农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2003年
2期
115-120
,共6页
戴美学%武波%柏学亮%张成刚%马庆生
戴美學%武波%柏學亮%張成剛%馬慶生
대미학%무파%백학량%장성강%마경생
苜蓿根瘤菌%聚羟丁酸%聚羟丁酸解聚酶基因%突变体
苜蓿根瘤菌%聚羥丁痠%聚羥丁痠解聚酶基因%突變體
목숙근류균%취간정산%취간정산해취매기인%돌변체
根据苜蓿根瘤菌(Sinorhizobiummeliloti)Rm1021基因组中与Ralstonia eutropha phaz基因同源部分序列设计1对引物,从S.meliloti基因组中用PCR扩增出835 bp phbD基因片段并克隆到载体pGEM(R)-TEasy上;通过在phbD基因内插入ΩSmSp和基因置换构建了phbD突变体.该突变体可积累比野生型菌株多1.0～2.6倍的聚羟丁酶(PHB).在YMA和TY平板上形成非粘液型菌落,而在以乙酰乙酸或3-羟丁酸为唯一碳源的M9基本培养基(M9-AA,M9-HB)上形成粘液型菌落.碱性磷酸酶测定结果表明,通过接合引入phbD突变体菌株中的exoF-phoA融合基因在YMB培养基中低量表达,而在M9-AA和M9-HB中高量表达.
根據苜蓿根瘤菌(Sinorhizobiummeliloti)Rm1021基因組中與Ralstonia eutropha phaz基因同源部分序列設計1對引物,從S.meliloti基因組中用PCR擴增齣835 bp phbD基因片段併剋隆到載體pGEM(R)-TEasy上;通過在phbD基因內插入ΩSmSp和基因置換構建瞭phbD突變體.該突變體可積纍比野生型菌株多1.0～2.6倍的聚羥丁酶(PHB).在YMA和TY平闆上形成非粘液型菌落,而在以乙酰乙痠或3-羥丁痠為唯一碳源的M9基本培養基(M9-AA,M9-HB)上形成粘液型菌落.堿性燐痠酶測定結果錶明,通過接閤引入phbD突變體菌株中的exoF-phoA融閤基因在YMB培養基中低量錶達,而在M9-AA和M9-HB中高量錶達.
근거목숙근류균(Sinorhizobiummeliloti)Rm1021기인조중여Ralstonia eutropha phaz기인동원부분서렬설계1대인물,종S.meliloti기인조중용PCR확증출835 bp phbD기인편단병극륭도재체pGEM(R)-TEasy상;통과재phbD기인내삽입ΩSmSp화기인치환구건료phbD돌변체.해돌변체가적루비야생형균주다1.0～2.6배적취간정매(PHB).재YMA화TY평판상형성비점액형균락,이재이을선을산혹3-간정산위유일탄원적M9기본배양기(M9-AA,M9-HB)상형성점액형균락.감성린산매측정결과표명,통과접합인입phbD돌변체균주중적exoF-phoA융합기인재YMB배양기중저량표체,이재M9-AA화M9-HB중고량표체.
