CAJ | 학술논문

目的制备特异性靶向的嵌合DNA疫苗,并探讨其诱导机体产生免疫应答的效果.方法用基因重组技术构建细胞毒T淋巴细胞抗原4(CTLA4)与戊肝病毒抗原HEVE2嵌合基因的真核表达质粒,同时构建不带CTLA4的pHEVE2作为平行对照质粒,体外转染COS-7细胞,Western blotting法检测细胞培养上清表达产物;于 BALB/c小鼠皮内注射,每隔2周1次,共免疫3次,100μg/次;于免疫的第3、5和10周ELISA检测抗体效价结果获得pHEVE2和pCTLA4-HEVE2嵌合基因真核表达质粒,测序证实各连接点阅读框序列正确;体外转染COS-7细胞,证明真核质粒以分泌形式表达;接种pCTLA4-HEVE2小鼠产生高滴度的特异性抗HEVE2抗体,比接种pHEVE2的对照组高50～100倍;pCTLA4-HEVE2诱导高水平的IgG2a、IgG2bTh1型抗体和IgG1 Th2型抗体应答,pHEVE2则以 IgG1 Th2型抗体应答为主.结论CTLA4-HEVE2嵌合DNA疫苗有效地增强动物对HEVE2抗原的免疫应答,为进一步研究抗原靶向性的嵌合DNA疫苗奠定基础.
목적제비특이성파향적감합DNA역묘,병탐토기유도궤체산생면역응답적효과.방법용기인중조기술구건세포독T림파세포항원4(CTLA4)여무간병독항원HEVE2감합기인적진핵표체질립,동시구건불대CTLA4적pHEVE2작위평행대조질립,체외전염COS-7세포,Western blotting법검측세포배양상청표체산물;우 BALB/c소서피내주사,매격2주1차,공면역3차,100μg/차;우면역적제3、5화10주ELISA검측항체효개결과획득pHEVE2화pCTLA4-HEVE2감합기인진핵표체질립,측서증실각련접점열독광서렬정학;체외전염COS-7세포,증명진핵질립이분비형식표체;접충pCTLA4-HEVE2소서산생고적도적특이성항HEVE2항체,비접충pHEVE2적대조조고50～100배;pCTLA4-HEVE2유도고수평적IgG2a、IgG2bTh1형항체화IgG1 Th2형항체응답,pHEVE2칙이 IgG1 Th2형항체응답위주.결론CTLA4-HEVE2감합DNA역묘유효지증강동물대HEVE2항원적면역응답,위진일보연구항원파향성적감합DNA역묘전정기출.