第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
2期
97-101
,共5页
车小燕%钱其军%刘思行%黄洁%邱庆林%徐华%吴文翰
車小燕%錢其軍%劉思行%黃潔%邱慶林%徐華%吳文翰
차소연%전기군%류사행%황길%구경림%서화%오문한
肝炎病毒,戊型%病毒性肝炎疫苗%疫苗,DNA%抗原提呈细胞%靶向性
肝炎病毒,戊型%病毒性肝炎疫苗%疫苗,DNA%抗原提呈細胞%靶嚮性
간염병독,무형%병독성간염역묘%역묘,DNA%항원제정세포%파향성
目的制备特异性靶向的嵌合DNA疫苗,并探讨其诱导机体产生免疫应答的效果.方法用基因重组技术构建细胞毒T淋巴细胞抗原4(CTLA4)与戊肝病毒抗原HEVE2嵌合基因的真核表达质粒,同时构建不带CTLA4的pHEVE2作为平行对照质粒,体外转染COS-7细胞,Western blotting法检测细胞培养上清表达产物;于 BALB/c小鼠皮内注射,每隔2周1次,共免疫3次,100μg/次;于免疫的第3、5和10周ELISA检测抗体效价结果获得pHEVE2和pCTLA4-HEVE2嵌合基因真核表达质粒,测序证实各连接点阅读框序列正确;体外转染COS-7细胞,证明真核质粒以分泌形式表达;接种pCTLA4-HEVE2小鼠产生高滴度的特异性抗HEVE2抗体,比接种pHEVE2的对照组高50~100倍;pCTLA4-HEVE2诱导高水平的IgG2a、IgG2bTh1型抗体和IgG1 Th2型抗体应答,pHEVE2则以 IgG1 Th2型抗体应答为主.结论CTLA4-HEVE2嵌合DNA疫苗有效地增强动物对HEVE2抗原的免疫应答,为进一步研究抗原靶向性的嵌合DNA疫苗奠定基础.
目的製備特異性靶嚮的嵌閤DNA疫苗,併探討其誘導機體產生免疫應答的效果.方法用基因重組技術構建細胞毒T淋巴細胞抗原4(CTLA4)與戊肝病毒抗原HEVE2嵌閤基因的真覈錶達質粒,同時構建不帶CTLA4的pHEVE2作為平行對照質粒,體外轉染COS-7細胞,Western blotting法檢測細胞培養上清錶達產物;于 BALB/c小鼠皮內註射,每隔2週1次,共免疫3次,100μg/次;于免疫的第3、5和10週ELISA檢測抗體效價結果穫得pHEVE2和pCTLA4-HEVE2嵌閤基因真覈錶達質粒,測序證實各連接點閱讀框序列正確;體外轉染COS-7細胞,證明真覈質粒以分泌形式錶達;接種pCTLA4-HEVE2小鼠產生高滴度的特異性抗HEVE2抗體,比接種pHEVE2的對照組高50~100倍;pCTLA4-HEVE2誘導高水平的IgG2a、IgG2bTh1型抗體和IgG1 Th2型抗體應答,pHEVE2則以 IgG1 Th2型抗體應答為主.結論CTLA4-HEVE2嵌閤DNA疫苗有效地增彊動物對HEVE2抗原的免疫應答,為進一步研究抗原靶嚮性的嵌閤DNA疫苗奠定基礎.
목적제비특이성파향적감합DNA역묘,병탐토기유도궤체산생면역응답적효과.방법용기인중조기술구건세포독T림파세포항원4(CTLA4)여무간병독항원HEVE2감합기인적진핵표체질립,동시구건불대CTLA4적pHEVE2작위평행대조질립,체외전염COS-7세포,Western blotting법검측세포배양상청표체산물;우 BALB/c소서피내주사,매격2주1차,공면역3차,100μg/차;우면역적제3、5화10주ELISA검측항체효개결과획득pHEVE2화pCTLA4-HEVE2감합기인진핵표체질립,측서증실각련접점열독광서렬정학;체외전염COS-7세포,증명진핵질립이분비형식표체;접충pCTLA4-HEVE2소서산생고적도적특이성항HEVE2항체,비접충pHEVE2적대조조고50~100배;pCTLA4-HEVE2유도고수평적IgG2a、IgG2bTh1형항체화IgG1 Th2형항체응답,pHEVE2칙이 IgG1 Th2형항체응답위주.결론CTLA4-HEVE2감합DNA역묘유효지증강동물대HEVE2항원적면역응답,위진일보연구항원파향성적감합DNA역묘전정기출.