美中国际眼科杂志
美中國際眼科雜誌
미중국제안과잡지
U.S. CHINESE JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2002年
1期
21-24
,共4页
成霄黎%彭清%任佩賢%王麗聰%趙志宏
成霄黎%彭清%任珮賢%王麗聰%趙誌宏
성소려%팽청%임패현%왕려총%조지굉
RPE細胞%培養%保存%兔%體外
RPE細胞%培養%保存%兔%體外
RPE세포%배양%보존%토%체외
目的探索一種有效的體外分離兔視網膜色素上皮(RPE)細胞的良好方法,并觀察RPE細胞凍存復蘇前後的形態學特黠.方法用兩步酶法分離兔RPE細胞,第一步酶(透明質酸酶+胰蛋白酶),用于鬆解視網膜神經上皮細胞與RPE細胞之間的連接;第二步(胰蛋白酶)用于離散RPE細胞,制成細胞懸液;然後用慢凍速融方法對細胞進行冷凍保存及復蘇,最後用4種方法(RPE片層觀察、H-E染色、免疫組化法及光、電鏡觀察法)觀察RPE細胞在凍存前後的形態特點.結果用此方法分離培養的細胞其結構完整,純度高,收獲量多,在體外生長旺盛,達到鋪滿匯合的時間縮短,同時維持體内細胞的許多生物學和形態學特點.細胞凍存復蘇後的存活率高達80%左右,且與凍存前細胞形態相比未見明顯差别.結論此分離培養方法及凍存復蘇法是高效可行的.
目的探索一種有效的體外分離兔視網膜色素上皮(RPE)細胞的良好方法,併觀察RPE細胞凍存復蘇前後的形態學特黠.方法用兩步酶法分離兔RPE細胞,第一步酶(透明質痠酶+胰蛋白酶),用于鬆解視網膜神經上皮細胞與RPE細胞之間的連接;第二步(胰蛋白酶)用于離散RPE細胞,製成細胞懸液;然後用慢凍速融方法對細胞進行冷凍保存及復蘇,最後用4種方法(RPE片層觀察、H-E染色、免疫組化法及光、電鏡觀察法)觀察RPE細胞在凍存前後的形態特點.結果用此方法分離培養的細胞其結構完整,純度高,收獲量多,在體外生長旺盛,達到鋪滿匯閤的時間縮短,同時維持體內細胞的許多生物學和形態學特點.細胞凍存復蘇後的存活率高達80%左右,且與凍存前細胞形態相比未見明顯差彆.結論此分離培養方法及凍存復蘇法是高效可行的.
목적탐색일종유효적체외분리토시망막색소상피(RPE)세포적량호방법,병관찰RPE세포동존복소전후적형태학특힐.방법용량보매법분리토RPE세포,제일보매(투명질산매+이단백매),용우송해시망막신경상피세포여RPE세포지간적련접;제이보(이단백매)용우리산RPE세포,제성세포현액;연후용만동속융방법대세포진행랭동보존급복소,최후용4종방법(RPE편층관찰、H-E염색、면역조화법급광、전경관찰법)관찰RPE세포재동존전후적형태특점.결과용차방법분리배양적세포기결구완정,순도고,수획량다,재체외생장왕성,달도포만회합적시간축단,동시유지체내세포적허다생물학화형태학특점.세포동존복소후적존활솔고달80%좌우,차여동존전세포형태상비미견명현차별.결론차분리배양방법급동존복소법시고효가행적.
