微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
3期
427-431
,共5页
蔡莹%陈秀珍%杨克迁%黄力%董志扬
蔡瑩%陳秀珍%楊剋遷%黃力%董誌颺
채형%진수진%양극천%황력%동지양
免培养技术%未培养微生物%环境基因组文库
免培養技術%未培養微生物%環境基因組文庫
면배양기술%미배양미생물%배경기인조문고
采用冻融、蛋白酶K、SDS-高盐-加热处理法联合的方法,直接从云南腾冲地区的一个弱碱性高温热泉沉积样品中提取和分离环境混合基因组DNA,产量为每克样品1～2μg DNA,用Promega试剂盒纯化后进行PstⅠ部分酶切处理,电泳回收3～8kb的片段后,构建了pSK(+)为载体的基因组文库,共获得25000个阳性克隆,平均插入片段长度为4.6kb.通过随机DNA 序列测定和基因注释,发现外源插入片段含有未见报道的序列.
採用凍融、蛋白酶K、SDS-高鹽-加熱處理法聯閤的方法,直接從雲南騰遲地區的一箇弱堿性高溫熱泉沉積樣品中提取和分離環境混閤基因組DNA,產量為每剋樣品1～2μg DNA,用Promega試劑盒純化後進行PstⅠ部分酶切處理,電泳迴收3～8kb的片段後,構建瞭pSK(+)為載體的基因組文庫,共穫得25000箇暘性剋隆,平均插入片段長度為4.6kb.通過隨機DNA 序列測定和基因註釋,髮現外源插入片段含有未見報道的序列.
채용동융、단백매K、SDS-고염-가열처리법연합적방법,직접종운남등충지구적일개약감성고온열천침적양품중제취화분리배경혼합기인조DNA,산량위매극양품1～2μg DNA,용Promega시제합순화후진행PstⅠ부분매절처리,전영회수3～8kb적편단후,구건료pSK(+)위재체적기인조문고,공획득25000개양성극륭,평균삽입편단장도위4.6kb.통과수궤DNA 서렬측정화기인주석,발현외원삽입편단함유미견보도적서렬.
