新疆医科大学学报
新疆醫科大學學報
신강의과대학학보
JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY
2006年
5期
397-400
,共4页
王艳萍%马正海%余勐%热西旦·尼格买提%马彩玲%张富春
王豔萍%馬正海%餘勐%熱西旦·尼格買提%馬綵玲%張富春
왕염평%마정해%여맹%열서단·니격매제%마채령%장부춘
宫颈癌%Skn-1a%克隆%表达
宮頸癌%Skn-1a%剋隆%錶達
궁경암%Skn-1a%극륭%표체
目的: 从宫颈癌组织中扩增与上皮细胞分化和人乳头瘤病毒(HPV)基因表达相关的转录因子Skn-1a cDNA,进而在真核细胞中表达该转录因子以了解其功能.方法:从宫颈癌组织中提取总RNA,以此为模板,RT-PCR扩增Skn-1a cDNA片段,将该cDNA 片段克隆至pMD18-T载体并进行序列分析,构建Skn-1a真核表达载体,并转染Hela细胞,检测其表达情况.结果: RT-PCR扩增得到约1 300 bp的cDNA 片段,将其克隆至pMD18-T载体,DNA测序表明,得到片段长度为1 308 bp ,为转录因子Skn-1a基因编码的cDNA,获得的Skn-1a cDNA序列与已公布的Skn-1a cDNA序列具有99.85%同源性, 有1个碱基的差异,但并未导致编码氨基酸的改变,继而构建了Skn-1a真核表达载体pcDNA3/Skn-1a,其转染Hela细胞后可正确表达.结论:转录因子Skn-1a在宫颈癌组织中有一定量的表达,并在体外培养的Hela细胞中获得表达.
目的: 從宮頸癌組織中擴增與上皮細胞分化和人乳頭瘤病毒(HPV)基因錶達相關的轉錄因子Skn-1a cDNA,進而在真覈細胞中錶達該轉錄因子以瞭解其功能.方法:從宮頸癌組織中提取總RNA,以此為模闆,RT-PCR擴增Skn-1a cDNA片段,將該cDNA 片段剋隆至pMD18-T載體併進行序列分析,構建Skn-1a真覈錶達載體,併轉染Hela細胞,檢測其錶達情況.結果: RT-PCR擴增得到約1 300 bp的cDNA 片段,將其剋隆至pMD18-T載體,DNA測序錶明,得到片段長度為1 308 bp ,為轉錄因子Skn-1a基因編碼的cDNA,穫得的Skn-1a cDNA序列與已公佈的Skn-1a cDNA序列具有99.85%同源性, 有1箇堿基的差異,但併未導緻編碼氨基痠的改變,繼而構建瞭Skn-1a真覈錶達載體pcDNA3/Skn-1a,其轉染Hela細胞後可正確錶達.結論:轉錄因子Skn-1a在宮頸癌組織中有一定量的錶達,併在體外培養的Hela細胞中穫得錶達.
목적: 종궁경암조직중확증여상피세포분화화인유두류병독(HPV)기인표체상관적전록인자Skn-1a cDNA,진이재진핵세포중표체해전록인자이료해기공능.방법:종궁경암조직중제취총RNA,이차위모판,RT-PCR확증Skn-1a cDNA편단,장해cDNA 편단극륭지pMD18-T재체병진행서렬분석,구건Skn-1a진핵표체재체,병전염Hela세포,검측기표체정황.결과: RT-PCR확증득도약1 300 bp적cDNA 편단,장기극륭지pMD18-T재체,DNA측서표명,득도편단장도위1 308 bp ,위전록인자Skn-1a기인편마적cDNA,획득적Skn-1a cDNA서렬여이공포적Skn-1a cDNA서렬구유99.85%동원성, 유1개감기적차이,단병미도치편마안기산적개변,계이구건료Skn-1a진핵표체재체pcDNA3/Skn-1a,기전염Hela세포후가정학표체.결론:전록인자Skn-1a재궁경암조직중유일정량적표체,병재체외배양적Hela세포중획득표체.
