山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2006年
9期
900-904
,共5页
丰荣杰%谢飞彬%千建荣%张帅%汤继文%李建民
豐榮傑%謝飛彬%韆建榮%張帥%湯繼文%李建民
봉영걸%사비빈%천건영%장수%탕계문%리건민
骨肉瘤%T淋巴细胞%单链克隆抗体%单链抗体片段%双体%免疫%细胞
骨肉瘤%T淋巴細胞%單鏈剋隆抗體%單鏈抗體片段%雙體%免疫%細胞
골육류%T림파세포%단련극륭항체%단련항체편단%쌍체%면역%세포
目的:构建能同时特异性靶向人骨肉瘤细胞表面肿瘤相关抗原TP-3及人T细胞表面TCR/CD3复合体CD3ε-链的双特异性单链抗体anti-CD3×anti-TP-3 diabody,对其生物学特性进行研究.方法:通过抗体可变区基因构建表达质粒pKIDCD3×TP-3,继而转染大肠杆菌K12系XL1-Blue株,表达活性抗体diabody,通过固定化金属离子亲和层析法纯化,流式细胞术、蛋白电泳进行特异性及亲和力的测定,并将其与人T细胞、骨肉瘤细胞共同培养,观察其诱导T细胞杀伤肿瘤细胞的活性.结果:diabody纯度高,在人血清中较为稳定,活性强,能够同时特异性地结合人骨肉瘤细胞及人T细胞,且将二者的距离拉近,特异性地溶解靶细胞.结论:双特异性单链抗体diabody能充分诱导人细胞毒T细胞活性,使骨肉瘤细胞溶解.
目的:構建能同時特異性靶嚮人骨肉瘤細胞錶麵腫瘤相關抗原TP-3及人T細胞錶麵TCR/CD3複閤體CD3ε-鏈的雙特異性單鏈抗體anti-CD3×anti-TP-3 diabody,對其生物學特性進行研究.方法:通過抗體可變區基因構建錶達質粒pKIDCD3×TP-3,繼而轉染大腸桿菌K12繫XL1-Blue株,錶達活性抗體diabody,通過固定化金屬離子親和層析法純化,流式細胞術、蛋白電泳進行特異性及親和力的測定,併將其與人T細胞、骨肉瘤細胞共同培養,觀察其誘導T細胞殺傷腫瘤細胞的活性.結果:diabody純度高,在人血清中較為穩定,活性彊,能夠同時特異性地結閤人骨肉瘤細胞及人T細胞,且將二者的距離拉近,特異性地溶解靶細胞.結論:雙特異性單鏈抗體diabody能充分誘導人細胞毒T細胞活性,使骨肉瘤細胞溶解.
목적:구건능동시특이성파향인골육류세포표면종류상관항원TP-3급인T세포표면TCR/CD3복합체CD3ε-련적쌍특이성단련항체anti-CD3×anti-TP-3 diabody,대기생물학특성진행연구.방법:통과항체가변구기인구건표체질립pKIDCD3×TP-3,계이전염대장간균K12계XL1-Blue주,표체활성항체diabody,통과고정화금속리자친화층석법순화,류식세포술、단백전영진행특이성급친화력적측정,병장기여인T세포、골육류세포공동배양,관찰기유도T세포살상종류세포적활성.결과:diabody순도고,재인혈청중교위은정,활성강,능구동시특이성지결합인골육류세포급인T세포,차장이자적거리랍근,특이성지용해파세포.결론:쌍특이성단련항체diabody능충분유도인세포독T세포활성,사골육류세포용해.
