中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2007年
5期
337-339
,共3页
王雷%李忠%刘晔%崔艳%卢彦欣%扈荣良
王雷%李忠%劉曄%崔豔%盧彥訢%扈榮良
왕뢰%리충%류엽%최염%로언흔%호영량
狂犬病病毒%糖蛋白%富集表位%原核表达
狂犬病病毒%糖蛋白%富集錶位%原覈錶達
광견병병독%당단백%부집표위%원핵표체
目的 构建狂犬病病毒标准强毒株(CVS-24)糖蛋白富集表位基因原核表达系统.方法 通过RT-PCR扩增CVS-24株糖蛋白两段表位富集区基因,并将其克隆至载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-G1和pET-G2,转化大肠杆菌Rosetta,IPTG诱导表达.表达产物分别经12%SDS-PAGE和Western blot检测.结果 大肠杆菌可高效表达目的基因,所表达的蛋白可被狂犬病病毒标准阳性血清所识别.经薄层扫描分析,目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的42%(G1)和34%(G2).结论 已成功构建了狂犬病病毒标准强毒株(CVS-24)糖蛋白富集表位基因原核表达系统,所表达的目的蛋白具有良好的免疫反应性,有可能作为检测狂犬病病毒血清抗体的候选基因.
目的 構建狂犬病病毒標準彊毒株(CVS-24)糖蛋白富集錶位基因原覈錶達繫統.方法 通過RT-PCR擴增CVS-24株糖蛋白兩段錶位富集區基因,併將其剋隆至載體pET-28a(+),構建重組錶達質粒pET-G1和pET-G2,轉化大腸桿菌Rosetta,IPTG誘導錶達.錶達產物分彆經12%SDS-PAGE和Western blot檢測.結果 大腸桿菌可高效錶達目的基因,所錶達的蛋白可被狂犬病病毒標準暘性血清所識彆.經薄層掃描分析,目的蛋白錶達量可佔菌體總蛋白的42%(G1)和34%(G2).結論 已成功構建瞭狂犬病病毒標準彊毒株(CVS-24)糖蛋白富集錶位基因原覈錶達繫統,所錶達的目的蛋白具有良好的免疫反應性,有可能作為檢測狂犬病病毒血清抗體的候選基因.
목적 구건광견병병독표준강독주(CVS-24)당단백부집표위기인원핵표체계통.방법 통과RT-PCR확증CVS-24주당단백량단표위부집구기인,병장기극륭지재체pET-28a(+),구건중조표체질립pET-G1화pET-G2,전화대장간균Rosetta,IPTG유도표체.표체산물분별경12%SDS-PAGE화Western blot검측.결과 대장간균가고효표체목적기인,소표체적단백가피광견병병독표준양성혈청소식별.경박층소묘분석,목적단백표체량가점균체총단백적42%(G1)화34%(G2).결론 이성공구건료광견병병독표준강독주(CVS-24)당단백부집표위기인원핵표체계통,소표체적목적단백구유량호적면역반응성,유가능작위검측광견병병독혈청항체적후선기인.
