CAJ | 학술논문

背景:常规细胞遗传学分析只能分析中期细胞,且受染色体数量和质量的影响.近年来发展的荧光原位杂交技术能在染色体制片和骨髓涂片上分析大量的中期或间期细胞,从而检测染色体的数目及其结构异常.目的:应用荧光原位杂交技术对骨髓增生异常综合征常见染色体异常情况进行检测,并与常规细胞遗传学分析结果作比较.设计、时间及地点:病例分析,于2006-08/2007-09在北京大学深圳医院进行.对象:选取同期在北京大学深圳医院初诊及随访并进行染色体检查的48例骨髓增生异常综合征患者,诊断和分型参照FAB标准.以同期住院的5例缺铁性贫血患者作为对照.实验所用双色探针及CEP8 SpectumAqua探针均购于Vysis公司.方法:患者骨髓标本均采用R显带技术进行常规细胞遗传学分析,以直接法或短期培养法制片,平均每例至少分析20个核型.剩余染色体标本进行荧光原位杂交检测,采用气干法滴片,按探针:水:杂交缓冲液=1:2:7配成工作液,加至玻片杂交区域内,应用荧光显微镜在滤色镜激发下观察间期细胞的红/绿色荧光杂交信号,每例分析200个细胞.主要观察指标:两种技术对骨髓细胞染色体异常阳性率的检测.结果:48例骨髓增生异常综合征患者随访24个月,共38例存活.[1]细胞遗传学分析检出染色体异常18例(37.5%),其中复杂异常4例(8.3%),5号染色体缺失或5号染色体长臂部分缺失5例(10.4%)、7号染色体缺失或7号染色体长臂部分缺失5例(10.4%)、8号染色体增加8例(16.6%)、20号染色体长臂部分缺失2例(4.6%)、不一致的易位3例(6.2%).[2]荧光原位杂交检测除证实细胞遗传学分析发现的5号、7号染色体异常各5例,以及8号染色体异常8例外,还检出2例5号染色体长臂部分缺失、5例7号染色体长臂部分缺失、1例7号染色体缺失,12例8号染色体增加,5号、7号、8号染色体异常阳性率分别增至14.5%,22.9%和41.7%.结论:采用组合探针的荧光原位杂交技术对于骨體增生异常综合征的5号、7号、8号染色体异常阳性检测率要高于细胞遗传学分析,但因其不能检出染色体易位而无法代替细胞遗传学分析.提示两种技术相结合可提高检测骨髓增生异常综合征染色体异常阳性率. 揹景:常規細胞遺傳學分析隻能分析中期細胞,且受染色體數量和質量的影響.近年來髮展的熒光原位雜交技術能在染色體製片和骨髓塗片上分析大量的中期或間期細胞,從而檢測染色體的數目及其結構異常.目的:應用熒光原位雜交技術對骨髓增生異常綜閤徵常見染色體異常情況進行檢測,併與常規細胞遺傳學分析結果作比較.設計、時間及地點:病例分析,于2006-08/2007-09在北京大學深圳醫院進行.對象:選取同期在北京大學深圳醫院初診及隨訪併進行染色體檢查的48例骨髓增生異常綜閤徵患者,診斷和分型參照FAB標準.以同期住院的5例缺鐵性貧血患者作為對照.實驗所用雙色探針及CEP8 SpectumAqua探針均購于Vysis公司.方法:患者骨髓標本均採用R顯帶技術進行常規細胞遺傳學分析,以直接法或短期培養法製片,平均每例至少分析20箇覈型.剩餘染色體標本進行熒光原位雜交檢測,採用氣榦法滴片,按探針:水:雜交緩遲液=1:2:7配成工作液,加至玻片雜交區域內,應用熒光顯微鏡在濾色鏡激髮下觀察間期細胞的紅/綠色熒光雜交信號,每例分析200箇細胞.主要觀察指標:兩種技術對骨髓細胞染色體異常暘性率的檢測.結果:48例骨髓增生異常綜閤徵患者隨訪24箇月,共38例存活.[1]細胞遺傳學分析檢齣染色體異常18例(37.5%),其中複雜異常4例(8.3%),5號染色體缺失或5號染色體長臂部分缺失5例(10.4%)、7號染色體缺失或7號染色體長臂部分缺失5例(10.4%)、8號染色體增加8例(16.6%)、20號染色體長臂部分缺失2例(4.6%)、不一緻的易位3例(6.2%).[2]熒光原位雜交檢測除證實細胞遺傳學分析髮現的5號、7號染色體異常各5例,以及8號染色體異常8例外,還檢齣2例5號染色體長臂部分缺失、5例7號染色體長臂部分缺失、1例7號染色體缺失,12例8號染色體增加,5號、7號、8號染色體異常暘性率分彆增至14.5%,22.9%和41.7%.結論:採用組閤探針的熒光原位雜交技術對于骨體增生異常綜閤徵的5號、7號、8號染色體異常暘性檢測率要高于細胞遺傳學分析,但因其不能檢齣染色體易位而無法代替細胞遺傳學分析.提示兩種技術相結閤可提高檢測骨髓增生異常綜閤徵染色體異常暘性率.
배경:상규세포유전학분석지능분석중기세포,차수염색체수량화질량적영향.근년래발전적형광원위잡교기술능재염색체제편화골수도편상분석대량적중기혹간기세포,종이검측염색체적수목급기결구이상.목적:응용형광원위잡교기술대골수증생이상종합정상견염색체이상정황진행검측,병여상규세포유전학분석결과작비교.설계、시간급지점:병례분석,우2006-08/2007-09재북경대학심수의원진행.대상:선취동기재북경대학심수의원초진급수방병진행염색체검사적48례골수증생이상종합정환자,진단화분형삼조FAB표준.이동기주원적5례결철성빈혈환자작위대조.실험소용쌍색탐침급CEP8 SpectumAqua탐침균구우Vysis공사.방법:환자골수표본균채용R현대기술진행상규세포유전학분석,이직접법혹단기배양법제편,평균매례지소분석20개핵형.잉여염색체표본진행형광원위잡교검측,채용기간법적편,안탐침:수:잡교완충액=1:2:7배성공작액,가지파편잡교구역내,응용형광현미경재려색경격발하관찰간기세포적홍/록색형광잡교신호,매례분석200개세포.주요관찰지표:량충기술대골수세포염색체이상양성솔적검측.결과:48례골수증생이상종합정환자수방24개월,공38례존활.[1]세포유전학분석검출염색체이상18례(37.5%),기중복잡이상4례(8.3%),5호염색체결실혹5호염색체장비부분결실5례(10.4%)、7호염색체결실혹7호염색체장비부분결실5례(10.4%)、8호염색체증가8례(16.6%)、20호염색체장비부분결실2례(4.6%)、불일치적역위3례(6.2%).[2]형광원위잡교검측제증실세포유전학분석발현적5호、7호염색체이상각5례,이급8호염색체이상8예외,환검출2례5호염색체장비부분결실、5례7호염색체장비부분결실、1례7호염색체결실,12례8호염색체증가,5호、7호、8호염색체이상양성솔분별증지14.5%,22.9%화41.7%.결론:채용조합탐침적형광원위잡교기술대우골체증생이상종합정적5호、7호、8호염색체이상양성검측솔요고우세포유전학분석,단인기불능검출염색체역위이무법대체세포유전학분석.제시량충기술상결합가제고검측골수증생이상종합정염색체이상양성솔.