基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
5期
499-503
,共5页
许慧雯%王彦斌%吴超%王健伟%洪涛
許慧雯%王彥斌%吳超%王健偉%洪濤
허혜문%왕언빈%오초%왕건위%홍도
冠状病毒%核衣壳蛋白%纯化
冠狀病毒%覈衣殼蛋白%純化
관상병독%핵의각단백%순화
目的 探索SARS冠状病毒(SARS-CoV)、HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1等5种人类冠状病毒以及牛冠状病毒(BCoV)、鼠肝炎病毒(MHV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)和禽传染性支气管炎病毒(IBV)4种动物冠状病毒核衣壳(N)蛋白在大肠杆菌中克隆表达及纯化条件.方法 利用原核表达载体pET30a(+)经IPTG诱导表达重组蛋白,并采用离子交换及镍离子螫合亲和层析法对重组蛋白进行纯化,用SDS-PAGE及Westernblot对重组蛋白进行鉴定.结果 成功表达、纯化出9种冠状病毒N蛋白,纯度达90%以上.结论 在原核系统中表达得到了高纯度的9种冠状病毒N蛋白,为相关功能性研究奠定了基础.
目的 探索SARS冠狀病毒(SARS-CoV)、HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1等5種人類冠狀病毒以及牛冠狀病毒(BCoV)、鼠肝炎病毒(MHV)、貓傳染性腹膜炎病毒(FIPV)和禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)4種動物冠狀病毒覈衣殼(N)蛋白在大腸桿菌中剋隆錶達及純化條件.方法 利用原覈錶達載體pET30a(+)經IPTG誘導錶達重組蛋白,併採用離子交換及鎳離子螫閤親和層析法對重組蛋白進行純化,用SDS-PAGE及Westernblot對重組蛋白進行鑒定.結果 成功錶達、純化齣9種冠狀病毒N蛋白,純度達90%以上.結論 在原覈繫統中錶達得到瞭高純度的9種冠狀病毒N蛋白,為相關功能性研究奠定瞭基礎.
목적 탐색SARS관상병독(SARS-CoV)、HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1등5충인류관상병독이급우관상병독(BCoV)、서간염병독(MHV)、묘전염성복막염병독(FIPV)화금전염성지기관염병독(IBV)4충동물관상병독핵의각(N)단백재대장간균중극륭표체급순화조건.방법 이용원핵표체재체pET30a(+)경IPTG유도표체중조단백,병채용리자교환급얼리자석합친화층석법대중조단백진행순화,용SDS-PAGE급Westernblot대중조단백진행감정.결과 성공표체、순화출9충관상병독N단백,순도체90%이상.결론 재원핵계통중표체득도료고순도적9충관상병독N단백,위상관공능성연구전정료기출.
