小鼠β防御素2与柯萨奇病毒B3 VP1融合基因疫苗的构建和免疫效果研究
소서β방어소2여가살기병독B3 VP1융합기인역묘적구건화면역효과연구
Construction of the mouse beta-defensin-2 and coxsackievirus B3 VP1 fusion DNA vaccine and study on its immunological effects in mice
  • 万方数据
    中国免疫学杂志 중국면역학잡지
    CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
    2009年 7期 647-650 ,共4页

    刘贵霞%金玉怀%殷长甫%高志云%揣侠%蓝佳明%张永红%李嘉%李伟%王永祥

    류귀하%금옥부%은장보%고지운%췌협%람가명%장영홍%리가%리위%왕영상

    柯萨奇病毒B3%β-防御素2%小鼠%DNA疫苗 柯薩奇病毒B3%β-防禦素2%小鼠%DNA疫苗
    가살기병독B3%β-방어소2%소서%DNA역묘
    目的:构建小鼠β-防御素2(Mouse beta-defensin-2,mBD2)与柯萨奇病毒B组3型(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合基因疫苗,并观察其对小鼠的免疫效果.方法:克隆mBD2基因,构建重组质粒pcDNA3/mBD2和pcDNA3/mBD2-L-VP1.将4～6周龄BALB/c雄性小鼠随机分为5组,分别于股四头肌注射PBS(A组)、pcDNA3(B组)、pcDNA3/mBD2(C组)、pcDNA3/VP1(D组)、pcDNA3/mBD2-L-VP1(E组),每次接种剂量100 μg/只,3周免疫1次,共3次.每次免疫后第14天眼眶静脉取血,用微量中和试验滴定血清中和抗体效价.第三次免疫后第21天,每组随机取3只小鼠,制备脾淋巴细胞悬液,用CCK-8细胞计数法检测特异性CTL的杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD50 CVB3病毒攻击,第7天取血处死,检测血清病毒滴度.结果:成功克隆了mBD2基因,构建了pcDNA3/mBD2和pcDNA3/mBD2-L-VP1两种重组质粒;D组和E组血清中和抗体滴度随免疫次数增加而提高(P＜0.01);E组血清中和抗体滴度和脾细胞特异性CTL杀伤活性显著高于其他组(P＜0.01),血中CVB3病毒滴度显著低于其他组(P＜0.01).结论:pcDNA3/mBD2-L-VP1能诱导小鼠对CVB3产生较强的体液免疫和细胞免疫,能有效抑制病毒在体内增殖.
    목적:구건소서β-방어소2(Mouse beta-defensin-2,mBD2)여가살기병독B조3형(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1융합기인역묘,병관찰기대소서적면역효과.방법:극륭mBD2기인,구건중조질립pcDNA3/mBD2화pcDNA3/mBD2-L-VP1.장4～6주령BALB/c웅성소서수궤분위5조,분별우고사두기주사PBS(A조)、pcDNA3(B조)、pcDNA3/mBD2(C조)、pcDNA3/VP1(D조)、pcDNA3/mBD2-L-VP1(E조),매차접충제량100 μg/지,3주면역1차,공3차.매차면역후제14천안광정맥취혈,용미량중화시험적정혈청중화항체효개.제삼차면역후제21천,매조수궤취3지소서,제비비림파세포현액,용CCK-8세포계수법검측특이성CTL적살상활성;매조취3지소서이3LD50 CVB3병독공격,제7천취혈처사,검측혈청병독적도.결과:성공극륭료mBD2기인,구건료pcDNA3/mBD2화pcDNA3/mBD2-L-VP1량충중조질립;D조화E조혈청중화항체적도수면역차수증가이제고(P＜0.01);E조혈청중화항체적도화비세포특이성CTL살상활성현저고우기타조(P＜0.01),혈중CVB3병독적도현저저우기타조(P＜0.01).결론:pcDNA3/mBD2-L-VP1능유도소서대CVB3산생교강적체액면역화세포면역,능유효억제병독재체내증식.
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