广州医学院学报
廣州醫學院學報
엄주의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE
2011年
2期
13-16
,共4页
邹东霆%周问渠%付欣%陈耀勇%李冰
鄒東霆%週問渠%付訢%陳耀勇%李冰
추동정%주문거%부흔%진요용%리빙
雌激素受体ER%基因突变%转染%荧光素酶
雌激素受體ER%基因突變%轉染%熒光素酶
자격소수체ER%기인돌변%전염%형광소매
目的:研究雌激素受体新突变Arg548/Cys548对受体介导的下游基因表达调控的影响,并探讨其机理和在女孩性早熟中的作用.方法:利用已构建的雌激素受体反应元件报道质粒pGL3-promoterERE,分别与野生型ESR1表达质粒PSG5-wtER和定点突变受体表达质粒PSG5-mutER共转染CMF-7和MDA-MB-231细胞,转染后加入雌激素、类似物和拮抗物处理,检测转染细胞的荧光素酶活性值.结果:转染突变型受体的CMF-7和MDA-MB-231细胞的荧光素酶活性值明显升高,在生理浓度雌激素及类似物植物类雌激素异黄酮刺激下,Cys548突变型受体基因转染比野生型受体转染的CMF-7和MDA 231细胞均表现出显著强烈的增加萤火虫荧光素酶的活性,表现高敏感的特性；单独加入TAM后荧光素酶活性值没有变化,而同时加入E2和TAM后荧光素酶活性值比加入E2的荧光素酶活性值则明显下降.结论:Cys548突变受体在体外具有较高的敏感性,对药物雌二醇及类似物反应敏感,拮抗剂TAM对受体的活性没有抑制作用,却能竞争性降低雌激素及类似物的作用.
目的:研究雌激素受體新突變Arg548/Cys548對受體介導的下遊基因錶達調控的影響,併探討其機理和在女孩性早熟中的作用.方法:利用已構建的雌激素受體反應元件報道質粒pGL3-promoterERE,分彆與野生型ESR1錶達質粒PSG5-wtER和定點突變受體錶達質粒PSG5-mutER共轉染CMF-7和MDA-MB-231細胞,轉染後加入雌激素、類似物和拮抗物處理,檢測轉染細胞的熒光素酶活性值.結果:轉染突變型受體的CMF-7和MDA-MB-231細胞的熒光素酶活性值明顯升高,在生理濃度雌激素及類似物植物類雌激素異黃酮刺激下,Cys548突變型受體基因轉染比野生型受體轉染的CMF-7和MDA 231細胞均錶現齣顯著彊烈的增加螢火蟲熒光素酶的活性,錶現高敏感的特性；單獨加入TAM後熒光素酶活性值沒有變化,而同時加入E2和TAM後熒光素酶活性值比加入E2的熒光素酶活性值則明顯下降.結論:Cys548突變受體在體外具有較高的敏感性,對藥物雌二醇及類似物反應敏感,拮抗劑TAM對受體的活性沒有抑製作用,卻能競爭性降低雌激素及類似物的作用.
목적:연구자격소수체신돌변Arg548/Cys548대수체개도적하유기인표체조공적영향,병탐토기궤리화재녀해성조숙중적작용.방법:이용이구건적자격소수체반응원건보도질립pGL3-promoterERE,분별여야생형ESR1표체질립PSG5-wtER화정점돌변수체표체질립PSG5-mutER공전염CMF-7화MDA-MB-231세포,전염후가입자격소、유사물화길항물처리,검측전염세포적형광소매활성치.결과:전염돌변형수체적CMF-7화MDA-MB-231세포적형광소매활성치명현승고,재생리농도자격소급유사물식물류자격소이황동자격하,Cys548돌변형수체기인전염비야생형수체전염적CMF-7화MDA 231세포균표현출현저강렬적증가형화충형광소매적활성,표현고민감적특성；단독가입TAM후형광소매활성치몰유변화,이동시가입E2화TAM후형광소매활성치비가입E2적형광소매활성치칙명현하강.결론:Cys548돌변수체재체외구유교고적민감성,대약물자이순급유사물반응민감,길항제TAM대수체적활성몰유억제작용,각능경쟁성강저자격소급유사물적작용.
