中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2011年
5期
151-157
,共7页
帅江冰%傅玲琳%张晓峰%励建荣
帥江冰%傅玲琳%張曉峰%勵建榮
수강빙%부령림%장효봉%려건영
副溶血弧菌%霍乱孤菌%双通道荧光PCR%Taqman探针
副溶血弧菌%霍亂孤菌%雙通道熒光PCR%Taqman探針
부용혈호균%곽란고균%쌍통도형광PCR%Taqman탐침
目的:建立水产品中副溶血弧菌和霍乱弧菌快速、敏感、特异的双通道荧光PCR同步鉴别体系.方法:针对副溶血弧菌TDH基因和霍乱弧菌ctxA基因设计合成2对特异性引物和2条Taqman探针,优化体系,建立双通道荧光PCR体系.结果:建立的双通道荧光PCR体系特异性强,引物和探针之间无干扰.对副溶血孤菌和霍乱孤菌的检测灵敏度高,下限均能达到5× 104 CFU/mL.体系稳定,重复性好,可操作性强,两种不同浓度基因组DNA无相互抑制现象,适用于不同条件、多种样品的检测.采用该方法对140份采自舟山、象山和杭州的各类水产品进行检测,副溶血弧菌和霍乱孤菌检出率分别为25.7％和3.6％,未见霍乱弧菌和副溶血弧菌混合污染的样品,表明建立的双重荧光PCR是一种可用于水产品等样品中副溶血弧菌和霍乱弧菌的快速、灵敏、特异的鉴别方法.
目的:建立水產品中副溶血弧菌和霍亂弧菌快速、敏感、特異的雙通道熒光PCR同步鑒彆體繫.方法:針對副溶血弧菌TDH基因和霍亂弧菌ctxA基因設計閤成2對特異性引物和2條Taqman探針,優化體繫,建立雙通道熒光PCR體繫.結果:建立的雙通道熒光PCR體繫特異性彊,引物和探針之間無榦擾.對副溶血孤菌和霍亂孤菌的檢測靈敏度高,下限均能達到5× 104 CFU/mL.體繫穩定,重複性好,可操作性彊,兩種不同濃度基因組DNA無相互抑製現象,適用于不同條件、多種樣品的檢測.採用該方法對140份採自舟山、象山和杭州的各類水產品進行檢測,副溶血弧菌和霍亂孤菌檢齣率分彆為25.7％和3.6％,未見霍亂弧菌和副溶血弧菌混閤汙染的樣品,錶明建立的雙重熒光PCR是一種可用于水產品等樣品中副溶血弧菌和霍亂弧菌的快速、靈敏、特異的鑒彆方法.
목적:건립수산품중부용혈호균화곽란호균쾌속、민감、특이적쌍통도형광PCR동보감별체계.방법:침대부용혈호균TDH기인화곽란호균ctxA기인설계합성2대특이성인물화2조Taqman탐침,우화체계,건립쌍통도형광PCR체계.결과:건립적쌍통도형광PCR체계특이성강,인물화탐침지간무간우.대부용혈고균화곽란고균적검측령민도고,하한균능체도5× 104 CFU/mL.체계은정,중복성호,가조작성강,량충불동농도기인조DNA무상호억제현상,괄용우불동조건、다충양품적검측.채용해방법대140빈채자주산、상산화항주적각류수산품진행검측,부용혈호균화곽란고균검출솔분별위25.7％화3.6％,미견곽란호균화부용혈호균혼합오염적양품,표명건립적쌍중형광PCR시일충가용우수산품등양품중부용혈호균화곽란호균적쾌속、령민、특이적감별방법.
