CAJ | 학술논문

为建立稳定的猪血管内皮细胞系,用于猪瘟病毒(CSFV)的致病机理研究提供理想的细胞模型,本研究利用逆转录病毒分别转导人端粒酶催化亚基(hTERT)基因或SV40大T抗原(SV40LT)基因进入猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC),通过G418或嘌呤霉素筛选阳性克隆,并进行细胞传代研究和细胞形态学及表型鉴定.分别获得了两种方法建立的永生化猪血管内皮细胞系SUVEC-hT和SUVEC-ST.两种细胞系均呈铺路石样单层排列生长,具有高度的增殖活性,在传代70代后不表现任何衰老细胞的特征,并保持接触生长抑制.SUVEC-hT细胞系持续表达hTERT、CD31、CD34和von Willebrand factor,并能摄取Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL).SUVEC-ST细胞系持续表达SV40 LT、CD31和CD34,并能摄取Dil-Ac-LDL.两个细胞系均保持正常的核型并对CSFV敏感.结果表明通过表达外源的hTERT或SV40 LT,SUVEC已被永生化,并且保留了血管内皮细胞的主要生物学特征.
위건립은정적저혈관내피세포계,용우저온병독(CSFV)적치병궤리연구제공이상적세포모형,본연구이용역전록병독분별전도인단립매최화아기(hTERT)기인혹SV40대T항원(SV40LT)기인진입저제정맥혈관내피세포(SUVEC),통과G418혹표령매소사선양성극륭,병진행세포전대연구화세포형태학급표형감정.분별획득료량충방법건립적영생화저혈관내피세포계SUVEC-hT화SUVEC-ST.량충세포계균정포로석양단층배렬생장,구유고도적증식활성,재전대70대후불표현임하쇠로세포적특정,병보지접촉생장억제.SUVEC-hT세포계지속표체hTERT、CD31、CD34화von Willebrand factor,병능섭취Dil표기적을선화저밀도지단백(Dil-Ac-LDL).SUVEC-ST세포계지속표체SV40 LT、CD31화CD34,병능섭취Dil-Ac-LDL.량개세포계균보지정상적핵형병대CSFV민감.결과표명통과표체외원적hTERT혹SV40 LT,SUVEC이피영생화,병차보류료혈관내피세포적주요생물학특정.