天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2012年
4期
312-315,417
,共5页
石磊芝%杜亚明%苏鹏%刘长军%王中彬
石磊芝%杜亞明%囌鵬%劉長軍%王中彬
석뢰지%두아명%소붕%류장군%왕중빈
食管肿瘤%癌%细胞系,肿瘤%RNA,小分子干扰%顺铂%抗药性,肿瘤%逆转录聚合酶链反应%印迹法,蛋白质%Nanog
食管腫瘤%癌%細胞繫,腫瘤%RNA,小分子榦擾%順鉑%抗藥性,腫瘤%逆轉錄聚閤酶鏈反應%印跡法,蛋白質%Nanog
식관종류%암%세포계,종류%RNA,소분자간우%순박%항약성,종류%역전록취합매련반응%인적법,단백질%Nanog
目的:检测干细胞基因Nanog在食管癌细胞系TE-1中的表达及其对顺铂敏感性的影响.方法:通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系TE-1中Nanog蛋白的表达；应用Lipofectamine 2000将荧光染料标记的Nanog siRNA转染进细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率,再通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测小干扰RNA (siRNA)的沉默效率；转染后24 h加入顺铂,继续孵育48 h后测得不同转染组的半数抑制浓度(IC50),后加入相同浓度的顺铂5 mg/L,48 h后测得不同转染组的生存率.结果:Nanog蛋白在食管癌细胞系TE-1中高表达,以核表达为主；Nanog siRNA细胞转染率为(67.57±16.90)％,沉默效率可高达85％以上；转染24 h后加入顺铂,继续孵育48 h后测得Nanog siRNA组的IC50较阴性对照组和空白组相比均降低,差异有统计学意义.加入相同浓度顺铂5 mg/L,48 h后测得Nanog siRNA组细胞生存率明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义.结论:Nanog在食管癌细胞系TE-1中高表达,降低Nanog的表达后能够提高食管癌细胞对顺铂的敏感性.
目的:檢測榦細胞基因Nanog在食管癌細胞繫TE-1中的錶達及其對順鉑敏感性的影響.方法:通過細胞免疫熒光檢測食管癌細胞繫TE-1中Nanog蛋白的錶達；應用Lipofectamine 2000將熒光染料標記的Nanog siRNA轉染進細胞中,通過熒光顯微鏡觀察轉染效率,再通過逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western blot檢測小榦擾RNA (siRNA)的沉默效率；轉染後24 h加入順鉑,繼續孵育48 h後測得不同轉染組的半數抑製濃度(IC50),後加入相同濃度的順鉑5 mg/L,48 h後測得不同轉染組的生存率.結果:Nanog蛋白在食管癌細胞繫TE-1中高錶達,以覈錶達為主；Nanog siRNA細胞轉染率為(67.57±16.90)％,沉默效率可高達85％以上；轉染24 h後加入順鉑,繼續孵育48 h後測得Nanog siRNA組的IC50較陰性對照組和空白組相比均降低,差異有統計學意義.加入相同濃度順鉑5 mg/L,48 h後測得Nanog siRNA組細胞生存率明顯低于陰性對照組和空白對照組,差異有統計學意義.結論:Nanog在食管癌細胞繫TE-1中高錶達,降低Nanog的錶達後能夠提高食管癌細胞對順鉑的敏感性.
목적:검측간세포기인Nanog재식관암세포계TE-1중적표체급기대순박민감성적영향.방법:통과세포면역형광검측식관암세포계TE-1중Nanog단백적표체；응용Lipofectamine 2000장형광염료표기적Nanog siRNA전염진세포중,통과형광현미경관찰전염효솔,재통과역전록취합매련반응(RT-PCR)화Western blot검측소간우RNA (siRNA)적침묵효솔；전염후24 h가입순박,계속부육48 h후측득불동전염조적반수억제농도(IC50),후가입상동농도적순박5 mg/L,48 h후측득불동전염조적생존솔.결과:Nanog단백재식관암세포계TE-1중고표체,이핵표체위주；Nanog siRNA세포전염솔위(67.57±16.90)％,침묵효솔가고체85％이상；전염24 h후가입순박,계속부육48 h후측득Nanog siRNA조적IC50교음성대조조화공백조상비균강저,차이유통계학의의.가입상동농도순박5 mg/L,48 h후측득Nanog siRNA조세포생존솔명현저우음성대조조화공백대조조,차이유통계학의의.결론:Nanog재식관암세포계TE-1중고표체,강저Nanog적표체후능구제고식관암세포대순박적민감성.
