浙江中医药大学学报
浙江中醫藥大學學報
절강중의약대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2012年
4期
407-410,421
,共5页
刘培%曹毅%陈微%刘改荣%杨晓红%陶茂灿%罗宏宾
劉培%曹毅%陳微%劉改榮%楊曉紅%陶茂燦%囉宏賓
류배%조의%진미%류개영%양효홍%도무찬%라굉빈
HaCaT细胞%NRP1%真核表达载体
HaCaT細胞%NRP1%真覈錶達載體
HaCaT세포%NRP1%진핵표체재체
[目的]从人角质形成细胞系HaCaT中克隆NRP1(Neuropilin-1)基因全长cDNA,构建含NRP1基因的重组真核表达载体,为下一步的NRP1基因功能研究奠定基础.[方法]采用RT-PCR法从人角质形成细胞系HaCaT中扩增NRP1基因全长cDNA,扩增产物通过TA克隆连接到pMD18-T载体进行测序鉴定,然后通过双酶切将全长cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),最后得到pcDNA3.1(+)-NRP1重组质粒.[结果]成功克隆NRP1基因全长cDNA,并成功构建了pcDNA3.1(+)-NRP1 真核表达载体.[结论]pcDNA3A(+)-NRP1 真核表达载体的成功构建可以为NRP1基因功能的进一步研究及其临床基因治疗奠定实验基础.
[目的]從人角質形成細胞繫HaCaT中剋隆NRP1(Neuropilin-1)基因全長cDNA,構建含NRP1基因的重組真覈錶達載體,為下一步的NRP1基因功能研究奠定基礎.[方法]採用RT-PCR法從人角質形成細胞繫HaCaT中擴增NRP1基因全長cDNA,擴增產物通過TA剋隆連接到pMD18-T載體進行測序鑒定,然後通過雙酶切將全長cDNA剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1(+),最後得到pcDNA3.1(+)-NRP1重組質粒.[結果]成功剋隆NRP1基因全長cDNA,併成功構建瞭pcDNA3.1(+)-NRP1 真覈錶達載體.[結論]pcDNA3A(+)-NRP1 真覈錶達載體的成功構建可以為NRP1基因功能的進一步研究及其臨床基因治療奠定實驗基礎.
[목적]종인각질형성세포계HaCaT중극륭NRP1(Neuropilin-1)기인전장cDNA,구건함NRP1기인적중조진핵표체재체,위하일보적NRP1기인공능연구전정기출.[방법]채용RT-PCR법종인각질형성세포계HaCaT중확증NRP1기인전장cDNA,확증산물통과TA극륭련접도pMD18-T재체진행측서감정,연후통과쌍매절장전장cDNA극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(+),최후득도pcDNA3.1(+)-NRP1중조질립.[결과]성공극륭NRP1기인전장cDNA,병성공구건료pcDNA3.1(+)-NRP1 진핵표체재체.[결론]pcDNA3A(+)-NRP1 진핵표체재체적성공구건가이위NRP1기인공능적진일보연구급기림상기인치료전정실험기출.
