中华小儿外科杂志
中華小兒外科雜誌
중화소인외과잡지
CHINESE JOURNAL OF PEDIATRIC SURGERY
2011年
2期
129-134
,共6页
刘玉圣%董蒨%鹿洪亭%江布先%姜忠%郝希伟%隋爱华
劉玉聖%董蒨%鹿洪亭%江佈先%薑忠%郝希偉%隋愛華
류옥골%동천%록홍정%강포선%강충%학희위%수애화
神经母细胞瘤%肿瘤转移%受体,CXCR4
神經母細胞瘤%腫瘤轉移%受體,CXCR4
신경모세포류%종류전이%수체,CXCR4
Neuroblastoma%Neoplasm metastasis%Receptors,CXCR4
目的 以自建的人神经母细胞瘤转移瘤(QDDQ-NM1)及原位瘤(QDDQ-NM2)细胞系的细胞为研究对象,探讨CXCR4在不同转移潜能人神经母细胞瘤细胞系细胞中的表达情况及其对瘤细胞趋化作用的影响.方法 采用RT-PCR检测两神经母细胞瘤细胞系细胞CXCR4 mRNA的表达;流式细胞仪直接免疫荧光法检测两细胞系细胞膜表面CXCR4蛋白的表达;通过趋化和趋化抑制实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对QDDQ-NM1和QDDQ-NM2细胞系瘤细胞的趋化作用.结果 RT-PCR显示QDDQ-NM1细胞系CXCR4mRNA的相对含量为0.57±0.08,QDDQ-NM2细胞系为0.29±0.05,两者比较差异有统计学意义(P=0.005＜0.05),流式细胞仪直接免疫荧光法检测两细胞系细胞膜表面CXCR4蛋白表达的阳性率分别为(64.59±1.57)%和(36.72±0.57)%,两者的差异有统计学意义(P=0.00＜0.05),CXCR4特异性配体CXCL12可在一定范围内呈浓度依赖性的趋化QDDQ-NM1和QDDQ-NM2细胞系细胞的迁移,以100 ng/ml的效果较为明显,两细胞系迁移到聚碳酸酯膜下的细胞数差异有统计学意义(P＜0.05).CXCR4特异性拮抗剂AMD3100能有效抑制这种趋化作用(P＜0.05).结论 QDDQ-NM1细胞系的细胞功能性高表达趋化因子受体CXCR4,可能与人神经母细胞瘤QDDQ-NM1细胞系细胞的体外高转移潜能有关.
目的 以自建的人神經母細胞瘤轉移瘤(QDDQ-NM1)及原位瘤(QDDQ-NM2)細胞繫的細胞為研究對象,探討CXCR4在不同轉移潛能人神經母細胞瘤細胞繫細胞中的錶達情況及其對瘤細胞趨化作用的影響.方法 採用RT-PCR檢測兩神經母細胞瘤細胞繫細胞CXCR4 mRNA的錶達;流式細胞儀直接免疫熒光法檢測兩細胞繫細胞膜錶麵CXCR4蛋白的錶達;通過趨化和趨化抑製實驗觀察CXCR4特異性配體CXCL12對QDDQ-NM1和QDDQ-NM2細胞繫瘤細胞的趨化作用.結果 RT-PCR顯示QDDQ-NM1細胞繫CXCR4mRNA的相對含量為0.57±0.08,QDDQ-NM2細胞繫為0.29±0.05,兩者比較差異有統計學意義(P=0.005＜0.05),流式細胞儀直接免疫熒光法檢測兩細胞繫細胞膜錶麵CXCR4蛋白錶達的暘性率分彆為(64.59±1.57)%和(36.72±0.57)%,兩者的差異有統計學意義(P=0.00＜0.05),CXCR4特異性配體CXCL12可在一定範圍內呈濃度依賴性的趨化QDDQ-NM1和QDDQ-NM2細胞繫細胞的遷移,以100 ng/ml的效果較為明顯,兩細胞繫遷移到聚碳痠酯膜下的細胞數差異有統計學意義(P＜0.05).CXCR4特異性拮抗劑AMD3100能有效抑製這種趨化作用(P＜0.05).結論 QDDQ-NM1細胞繫的細胞功能性高錶達趨化因子受體CXCR4,可能與人神經母細胞瘤QDDQ-NM1細胞繫細胞的體外高轉移潛能有關.
목적 이자건적인신경모세포류전이류(QDDQ-NM1)급원위류(QDDQ-NM2)세포계적세포위연구대상,탐토CXCR4재불동전이잠능인신경모세포류세포계세포중적표체정황급기대류세포추화작용적영향.방법 채용RT-PCR검측량신경모세포류세포계세포CXCR4 mRNA적표체;류식세포의직접면역형광법검측량세포계세포막표면CXCR4단백적표체;통과추화화추화억제실험관찰CXCR4특이성배체CXCL12대QDDQ-NM1화QDDQ-NM2세포계류세포적추화작용.결과 RT-PCR현시QDDQ-NM1세포계CXCR4mRNA적상대함량위0.57±0.08,QDDQ-NM2세포계위0.29±0.05,량자비교차이유통계학의의(P=0.005＜0.05),류식세포의직접면역형광법검측량세포계세포막표면CXCR4단백표체적양성솔분별위(64.59±1.57)%화(36.72±0.57)%,량자적차이유통계학의의(P=0.00＜0.05),CXCR4특이성배체CXCL12가재일정범위내정농도의뢰성적추화QDDQ-NM1화QDDQ-NM2세포계세포적천이,이100 ng/ml적효과교위명현,량세포계천이도취탄산지막하적세포수차이유통계학의의(P＜0.05).CXCR4특이성길항제AMD3100능유효억제저충추화작용(P＜0.05).결론 QDDQ-NM1세포계적세포공능성고표체추화인자수체CXCR4,가능여인신경모세포류QDDQ-NM1세포계세포적체외고전이잠능유관.
Objective To study the expression of functional chemokine receptor CXCR4 and its effects on the metastatic potential of human neuroblastoma.Methods Two human neuroblastoma cell lines were used in this study,including QDDQ-NM1 with high metastatic potential and QDDQ-NM2 with low metastatic potential.The expression of CXCR4 was explored at mRNA level using RT-PCR,and the protein level by flow cytometry.Chemotaxis assay was also performed to study the migratory response of QDDQ-NM1 and QDDQ-NM2 to CXCR4 ligand CXCL12.Results The mRNA of CXCR4 was higher in QDDQ-NM1 group than that in QDDQ-NM2 group (0.57±0.08 vs 0.29±0.05,P =0.005).The expression of CXCR4 on QDDQ-NM1 group was also higher than that in QDDQ-NM2 group [(64.59 ±1.57) % vs (36.72 ± 0.57) %,P＜0.05] The QDDQ-NM1 cells exhibited stronger migratory response to CXCL12 in a concentration dependent manner (P＜0.05),and the response peaked to CXCL12 at 100 ng/ml.AMD3100,a specific CXCR4 antagonist,could reverse the tumor's migratory response to CXCL12.Conclusions The expression of CXCR4 is associated with the metastatic potential of human neuroblastoma.
