四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2005年
2期
172-175
,共4页
赵福军%李虹%程鸿鸣%曾浩%魏强%李响
趙福軍%李虹%程鴻鳴%曾浩%魏彊%李響
조복군%리홍%정홍명%증호%위강%리향
前列腺特异性膜抗原%启动子%增强子%尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因%质粒
前列腺特異性膜抗原%啟動子%增彊子%尿嘧啶燐痠覈糖轉移酶基因%質粒
전렬선특이성막항원%계동자%증강자%뇨밀정린산핵당전이매기인%질립
目的构建前列腺特异性膜抗原启动子增强子靶向性调控的UPRT基因真核表达重组质粒(pPSMAenhancer/promothr-UPRT).方法采用PCR技术从大肠杆菌JM109基因组中扩增UPRT基因,通过分子克隆技术将其克隆到包括前列腺特异性膜抗原启动子增强子靶向性调控的pEGFP-1的质粒.利用重组质粒pPSMAenhancer/promoter-UPRT)转染LNcap细胞,MTT法检测5-氯尿嘧啶(5-FU)对转染LNcap细胞存活率的影响.结果质粒pPSMAenhancer/promoter-EGFP双酶切去除EGFP,连接上UPRT基因,成功构建pPSMAenhancer/promother-UPRT,并转染LNcap细胞,使LNcap细胞对5-FU的杀伤敏感性大大提高.结论pPSMAenhancer/promoter-UPRT的构建和表达,为进一步研究UPRT基因对5-FU的靶向性杀伤前列腺癌细胞增强作用和对前列腺癌自杀基因系统(CD/5-FC系统)的放大效应奠定了基础.
目的構建前列腺特異性膜抗原啟動子增彊子靶嚮性調控的UPRT基因真覈錶達重組質粒(pPSMAenhancer/promothr-UPRT).方法採用PCR技術從大腸桿菌JM109基因組中擴增UPRT基因,通過分子剋隆技術將其剋隆到包括前列腺特異性膜抗原啟動子增彊子靶嚮性調控的pEGFP-1的質粒.利用重組質粒pPSMAenhancer/promoter-UPRT)轉染LNcap細胞,MTT法檢測5-氯尿嘧啶(5-FU)對轉染LNcap細胞存活率的影響.結果質粒pPSMAenhancer/promoter-EGFP雙酶切去除EGFP,連接上UPRT基因,成功構建pPSMAenhancer/promother-UPRT,併轉染LNcap細胞,使LNcap細胞對5-FU的殺傷敏感性大大提高.結論pPSMAenhancer/promoter-UPRT的構建和錶達,為進一步研究UPRT基因對5-FU的靶嚮性殺傷前列腺癌細胞增彊作用和對前列腺癌自殺基因繫統(CD/5-FC繫統)的放大效應奠定瞭基礎.
목적구건전렬선특이성막항원계동자증강자파향성조공적UPRT기인진핵표체중조질립(pPSMAenhancer/promothr-UPRT).방법채용PCR기술종대장간균JM109기인조중확증UPRT기인,통과분자극륭기술장기극륭도포괄전렬선특이성막항원계동자증강자파향성조공적pEGFP-1적질립.이용중조질립pPSMAenhancer/promoter-UPRT)전염LNcap세포,MTT법검측5-록뇨밀정(5-FU)대전염LNcap세포존활솔적영향.결과질립pPSMAenhancer/promoter-EGFP쌍매절거제EGFP,련접상UPRT기인,성공구건pPSMAenhancer/promother-UPRT,병전염LNcap세포,사LNcap세포대5-FU적살상민감성대대제고.결론pPSMAenhancer/promoter-UPRT적구건화표체,위진일보연구UPRT기인대5-FU적파향성살상전렬선암세포증강작용화대전렬선암자살기인계통(CD/5-FC계통)적방대효응전정료기출.
