上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2007年
9期
1115-1118
,共4页
魏峰涛%方宁远%杨巍维%于卓
魏峰濤%方寧遠%楊巍維%于卓
위봉도%방저원%양외유%우탁
局部肾素血管紧张素系统%Transwell%心肌纤维化
跼部腎素血管緊張素繫統%Transwell%心肌纖維化
국부신소혈관긴장소계통%Transwell%심기섬유화
目的 建立局部肾素血管紧张素系统(RAS)对大鼠心肌纤维化影响的体外模型.方法 原代培养新生大鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞,用RT-PCR鉴定两种细胞RAS各组分在基因水平的表达.从RAS各组分蛋白代谢的角度,采用依那普利阻断心肌细胞血管紧张素转换酶(ACE),放免法观察培养基中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)量的变化,结合Western blotting验证ACE2的存在,确定心肌细胞局部RAS各组分在蛋白水平的存在.以Transwell共培养心肌细胞和心肌成纤维细胞,构建局部RAS影响心肌纤维化的体外模型.结果 在心肌细胞中检测到RAS各组分基因的表达,但在成纤维细胞中未发现肾素和ACE2的表达;对心肌细胞采用依那普利干预后AngⅡ呈剂量依赖性下降,10-7 mol/L组[(36.24±3.27)pg/mL]与对照组[(44.08±0.76) pg/mL]有显著差异(P＜0.05);Western blotting证实心肌细胞在蛋白水平有ACE2的表达.结论 心肌细胞能够单独形成局部RAS;而成纤维细胞因为不能生成肾素和ACE2,则本身不能形成局部RAS.以Transwell体外共培养心肌细胞和心肌成纤维细胞能够建立一个用于研究局部RAS对心肌纤维化影响的体外模型.
目的 建立跼部腎素血管緊張素繫統(RAS)對大鼠心肌纖維化影響的體外模型.方法 原代培養新生大鼠心肌細胞和心肌成纖維細胞,用RT-PCR鑒定兩種細胞RAS各組分在基因水平的錶達.從RAS各組分蛋白代謝的角度,採用依那普利阻斷心肌細胞血管緊張素轉換酶(ACE),放免法觀察培養基中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)量的變化,結閤Western blotting驗證ACE2的存在,確定心肌細胞跼部RAS各組分在蛋白水平的存在.以Transwell共培養心肌細胞和心肌成纖維細胞,構建跼部RAS影響心肌纖維化的體外模型.結果 在心肌細胞中檢測到RAS各組分基因的錶達,但在成纖維細胞中未髮現腎素和ACE2的錶達;對心肌細胞採用依那普利榦預後AngⅡ呈劑量依賴性下降,10-7 mol/L組[(36.24±3.27)pg/mL]與對照組[(44.08±0.76) pg/mL]有顯著差異(P＜0.05);Western blotting證實心肌細胞在蛋白水平有ACE2的錶達.結論 心肌細胞能夠單獨形成跼部RAS;而成纖維細胞因為不能生成腎素和ACE2,則本身不能形成跼部RAS.以Transwell體外共培養心肌細胞和心肌成纖維細胞能夠建立一箇用于研究跼部RAS對心肌纖維化影響的體外模型.
목적 건립국부신소혈관긴장소계통(RAS)대대서심기섬유화영향적체외모형.방법 원대배양신생대서심기세포화심기성섬유세포,용RT-PCR감정량충세포RAS각조분재기인수평적표체.종RAS각조분단백대사적각도,채용의나보리조단심기세포혈관긴장소전환매(ACE),방면법관찰배양기중혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)량적변화,결합Western blotting험증ACE2적존재,학정심기세포국부RAS각조분재단백수평적존재.이Transwell공배양심기세포화심기성섬유세포,구건국부RAS영향심기섬유화적체외모형.결과 재심기세포중검측도RAS각조분기인적표체,단재성섬유세포중미발현신소화ACE2적표체;대심기세포채용의나보리간예후AngⅡ정제량의뢰성하강,10-7 mol/L조[(36.24±3.27)pg/mL]여대조조[(44.08±0.76) pg/mL]유현저차이(P＜0.05);Western blotting증실심기세포재단백수평유ACE2적표체.결론 심기세포능구단독형성국부RAS;이성섬유세포인위불능생성신소화ACE2,칙본신불능형성국부RAS.이Transwell체외공배양심기세포화심기성섬유세포능구건립일개용우연구국부RAS대심기섬유화영향적체외모형.
