中国热带医学
中國熱帶醫學
중국열대의학
CHINA TROPICAL MEDICINE
2008年
3期
367-369,375
,共4页
李永伟%郭云蔚%朱明芬%尉秀清%陈伟%凌小强%李刚
李永偉%郭雲蔚%硃明芬%尉秀清%陳偉%凌小彊%李剛
리영위%곽운위%주명분%위수청%진위%릉소강%리강
乙型肝炎病毒%Toll样受体2、4%HepG2细胞株
乙型肝炎病毒%Toll樣受體2、4%HepG2細胞株
을형간염병독%Toll양수체2、4%HepG2세포주
目的 探讨乙肝病毒全基因组瞬时转染HepG2细胞后,对HBV抗原分泌,病原识别受体Toll样受体2、4(TLR2、4)的表达及细胞增殖的影响.方法 已构建pBlueScript-HBV质粒并经测序,转化宿主菌,摇菌后提取质粒,用Sapl酶切,获得HBV 3.2kb基因组,采用脂质体瞬时转染肝癌细胞株HepG2,IMX检测HBV所分泌抗原,台盼蓝计数检测细胞增殖活性,直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测TLR2、4在细胞株上表达的阳性细胞率,并与空白对照绗对比.结果 HBsAg利HBeAg的分泌随着转染HBV DNA量的增加而升高,除4μg和6μg组两组间比较的表面抗原外,差异均有显著性意义(P＜0.05).TLR2、4在转染后均有上调,TLR4在各组问差异显著(P＜0.05),但TLR2只在最大剂量转染组时差异有显著性(P＜0.05).台盼蓝拒染法示细胞存活随转染剂量的升高而减少(P＜0.05),但4μg和6μg两组闻比较无显著意义(P＞0.05).而各转染剂量组HBsAg和e抗原的分泌及细胞的存活数均与TLR2、4的表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 研究结果 初步表明乙肝病毒可能直接引起HepG2细胞艘、4的上调,而且TLR的上调可能启动了细胞的凋亡或坏死机制,成为HBV损伤细胞的非免疫细胞介导机制.
目的 探討乙肝病毒全基因組瞬時轉染HepG2細胞後,對HBV抗原分泌,病原識彆受體Toll樣受體2、4(TLR2、4)的錶達及細胞增殖的影響.方法 已構建pBlueScript-HBV質粒併經測序,轉化宿主菌,搖菌後提取質粒,用Sapl酶切,穫得HBV 3.2kb基因組,採用脂質體瞬時轉染肝癌細胞株HepG2,IMX檢測HBV所分泌抗原,檯盼藍計數檢測細胞增殖活性,直接免疫熒光流式細胞術(FCM)檢測TLR2、4在細胞株上錶達的暘性細胞率,併與空白對照絎對比.結果 HBsAg利HBeAg的分泌隨著轉染HBV DNA量的增加而升高,除4μg和6μg組兩組間比較的錶麵抗原外,差異均有顯著性意義(P＜0.05).TLR2、4在轉染後均有上調,TLR4在各組問差異顯著(P＜0.05),但TLR2隻在最大劑量轉染組時差異有顯著性(P＜0.05).檯盼藍拒染法示細胞存活隨轉染劑量的升高而減少(P＜0.05),但4μg和6μg兩組聞比較無顯著意義(P＞0.05).而各轉染劑量組HBsAg和e抗原的分泌及細胞的存活數均與TLR2、4的錶達呈顯著正相關(P＜0.01).結論 研究結果 初步錶明乙肝病毒可能直接引起HepG2細胞艘、4的上調,而且TLR的上調可能啟動瞭細胞的凋亡或壞死機製,成為HBV損傷細胞的非免疫細胞介導機製.
목적 탐토을간병독전기인조순시전염HepG2세포후,대HBV항원분비,병원식별수체Toll양수체2、4(TLR2、4)적표체급세포증식적영향.방법 이구건pBlueScript-HBV질립병경측서,전화숙주균,요균후제취질립,용Sapl매절,획득HBV 3.2kb기인조,채용지질체순시전염간암세포주HepG2,IMX검측HBV소분비항원,태반람계수검측세포증식활성,직접면역형광류식세포술(FCM)검측TLR2、4재세포주상표체적양성세포솔,병여공백대조행대비.결과 HBsAg리HBeAg적분비수착전염HBV DNA량적증가이승고,제4μg화6μg조량조간비교적표면항원외,차이균유현저성의의(P＜0.05).TLR2、4재전염후균유상조,TLR4재각조문차이현저(P＜0.05),단TLR2지재최대제량전염조시차이유현저성(P＜0.05).태반람거염법시세포존활수전염제량적승고이감소(P＜0.05),단4μg화6μg량조문비교무현저의의(P＞0.05).이각전염제량조HBsAg화e항원적분비급세포적존활수균여TLR2、4적표체정현저정상관(P＜0.01).결론 연구결과 초보표명을간병독가능직접인기HepG2세포소、4적상조,이차TLR적상조가능계동료세포적조망혹배사궤제,성위HBV손상세포적비면역세포개도궤제.
