中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
3期
13-20
,共8页
刘宾%滕达%杨雅麟%王建华
劉賓%滕達%楊雅麟%王建華
류빈%등체%양아린%왕건화
大豆球蛋白%A3酸性多肽%原核表达%B细胞表位
大豆毬蛋白%A3痠性多肽%原覈錶達%B細胞錶位
대두구단백%A3산성다태%원핵표체%B세포표위
人工合成大豆球蛋白A3酸性多肽基因cDNA序列,构建原核表达载体pET30a-A3,将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21后用IPTG诱导表达,经His亲和层析纯化,获得纯度约91％融合A3蛋白.Western blotting 显示,所获得的A3融合蛋白可与对豆粕过敏的仔猪血清发生免疫反应,表明所得融合蛋白具有免疫活性.利用Lasergene7.0中Protean软件对A3蛋白氨基酸序列进行B细胞抗原表位预测和分析,推测其中97～113、156～160、169～176、186～193、271～284和295～312氨基酸区段是A3酸性多肽的B细胞抗原表位,其中169～176区段的平均抗原指数最高,表位抗原性最强.本结果为进一步研究该蛋白致敏机理及单抗制备奠定了初步基础.
人工閤成大豆毬蛋白A3痠性多肽基因cDNA序列,構建原覈錶達載體pET30a-A3,將重組質粒轉化大腸桿菌(E.coli)BL21後用IPTG誘導錶達,經His親和層析純化,穫得純度約91％融閤A3蛋白.Western blotting 顯示,所穫得的A3融閤蛋白可與對豆粕過敏的仔豬血清髮生免疫反應,錶明所得融閤蛋白具有免疫活性.利用Lasergene7.0中Protean軟件對A3蛋白氨基痠序列進行B細胞抗原錶位預測和分析,推測其中97～113、156～160、169～176、186～193、271～284和295～312氨基痠區段是A3痠性多肽的B細胞抗原錶位,其中169～176區段的平均抗原指數最高,錶位抗原性最彊.本結果為進一步研究該蛋白緻敏機理及單抗製備奠定瞭初步基礎.
인공합성대두구단백A3산성다태기인cDNA서렬,구건원핵표체재체pET30a-A3,장중조질립전화대장간균(E.coli)BL21후용IPTG유도표체,경His친화층석순화,획득순도약91％융합A3단백.Western blotting 현시,소획득적A3융합단백가여대두박과민적자저혈청발생면역반응,표명소득융합단백구유면역활성.이용Lasergene7.0중Protean연건대A3단백안기산서렬진행B세포항원표위예측화분석,추측기중97～113、156～160、169～176、186～193、271～284화295～312안기산구단시A3산성다태적B세포항원표위,기중169～176구단적평균항원지수최고,표위항원성최강.본결과위진일보연구해단백치민궤리급단항제비전정료초보기출.
