检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2013年
10期
913-916
,共4页
张健%简敏华%蒋玲丽%葛丹红
張健%簡敏華%蔣玲麗%葛丹紅
장건%간민화%장령려%갈단홍
线粒体肌酸激酶%广泛型亚型%酶联免疫吸附试验
線粒體肌痠激酶%廣汎型亞型%酶聯免疫吸附試驗
선립체기산격매%엄범형아형%매련면역흡부시험
目的 建立测定人血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA).方法 应用原核表达的uMtCK重组蛋白免疫小鼠获得7株单克隆抗体,采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合,其中抗体19F11进行辣根过氧化物酶(HRP)标记作为检测抗体,抗体3C1作为俘获抗体,建立检测人uMtCK双抗体夹心ELISA方法,并进行方法学评价.同时采用该法检测50名健康体检者和85例肿瘤标志物[甲胎蛋白(AFP)或癌胚抗原(CEA)]阳性患者的血清.结果 通过筛查获得配对抗体,建立检测人uMtCK的双抗体夹心ELISA方法.该法的检测限为28.8 ng/mL,批内变异系数(CV)为4.5%~7.7%,批间CV为8.2%~13.5%,平均回收率为97.1%.用该法检测50名健康体检者血清uMtCK浓度,结果均为阴性;85例肿瘤标志物阳性患者中有15例检出uMtCK,浓度为52.8~1 442.2 ng/mL.结论 建立的双抗体夹心ELISA可以用于测定人血清uMtCK浓度.
目的 建立測定人血清廣汎型線粒體肌痠激酶(uMtCK)濃度的雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA).方法 應用原覈錶達的uMtCK重組蛋白免疫小鼠穫得7株單剋隆抗體,採用棋盤格滴定法篩選齣最佳雙抗體組閤,其中抗體19F11進行辣根過氧化物酶(HRP)標記作為檢測抗體,抗體3C1作為俘穫抗體,建立檢測人uMtCK雙抗體夾心ELISA方法,併進行方法學評價.同時採用該法檢測50名健康體檢者和85例腫瘤標誌物[甲胎蛋白(AFP)或癌胚抗原(CEA)]暘性患者的血清.結果 通過篩查穫得配對抗體,建立檢測人uMtCK的雙抗體夾心ELISA方法.該法的檢測限為28.8 ng/mL,批內變異繫數(CV)為4.5%~7.7%,批間CV為8.2%~13.5%,平均迴收率為97.1%.用該法檢測50名健康體檢者血清uMtCK濃度,結果均為陰性;85例腫瘤標誌物暘性患者中有15例檢齣uMtCK,濃度為52.8~1 442.2 ng/mL.結論 建立的雙抗體夾心ELISA可以用于測定人血清uMtCK濃度.
목적 건립측정인혈청엄범형선립체기산격매(uMtCK)농도적쌍항체협심매련면역흡부시험(ELISA).방법 응용원핵표체적uMtCK중조단백면역소서획득7주단극륭항체,채용기반격적정법사선출최가쌍항체조합,기중항체19F11진행랄근과양화물매(HRP)표기작위검측항체,항체3C1작위부획항체,건립검측인uMtCK쌍항체협심ELISA방법,병진행방법학평개.동시채용해법검측50명건강체검자화85례종류표지물[갑태단백(AFP)혹암배항원(CEA)]양성환자적혈청.결과 통과사사획득배대항체,건립검측인uMtCK적쌍항체협심ELISA방법.해법적검측한위28.8 ng/mL,비내변이계수(CV)위4.5%~7.7%,비간CV위8.2%~13.5%,평균회수솔위97.1%.용해법검측50명건강체검자혈청uMtCK농도,결과균위음성;85례종류표지물양성환자중유15례검출uMtCK,농도위52.8~1 442.2 ng/mL.결론 건립적쌍항체협심ELISA가이용우측정인혈청uMtCK농도.