中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2007年
2期
111-114
,共4页
胡永仙%俞康%谭映霞%沈志坚%江松福%钱红兰%梁彬%单大铭
鬍永仙%俞康%譚映霞%瀋誌堅%江鬆福%錢紅蘭%樑彬%單大銘
호영선%유강%담영하%침지견%강송복%전홍란%량빈%단대명
T细胞受体%T淋巴细胞%肿瘤免疫治疗
T細胞受體%T淋巴細胞%腫瘤免疫治療
T세포수체%T림파세포%종류면역치료
目的 构建表达抗CD20scFv/CD80/CD28/ζ重组基因修饰T细胞,体外观察其特异性清除CD20+淋巴瘤细胞的能力,为肿瘤的过继免疫治疗提供新思路.方法 采用DNA重组技术将pBULLET上的CD28-ζ cDNA插入到已含有抗CD20scFv/CD80的真核表达载体pLNCX质粒上,转染PA317包装细胞,挑取高滴度的包装细胞收获病毒,用收获的病毒感染刺激分裂的人外周血T淋巴细胞,经G418筛选1周后与CD20+淋巴瘤细胞株Daudi、Raji在体外共同培养,用非放射性的细胞杀伤试剂盒和ELISA检测试剂盒分别检测T细胞的抗原特异性杀伤和细胞因子分泌的功能.结果 酶切及测序鉴定均证实pLNCX/抗CD20scFv/CD80/CD28/ζ构建成功,重组基因修饰的T细胞能在体外杀伤CD20+淋巴瘤细胞株Daudi、Raji,而对CD20-细胞株K562无杀伤作用,同时CD20+靶细胞组上清液中IL-2和IFN-γ水平与CD20-组相比明显升高.结论 重组基因修饰的CD20靶向性T细胞构建成功.该T细胞在体外能特异性杀伤CD20+淋巴瘤细胞株.
目的 構建錶達抗CD20scFv/CD80/CD28/ζ重組基因脩飾T細胞,體外觀察其特異性清除CD20+淋巴瘤細胞的能力,為腫瘤的過繼免疫治療提供新思路.方法 採用DNA重組技術將pBULLET上的CD28-ζ cDNA插入到已含有抗CD20scFv/CD80的真覈錶達載體pLNCX質粒上,轉染PA317包裝細胞,挑取高滴度的包裝細胞收穫病毒,用收穫的病毒感染刺激分裂的人外週血T淋巴細胞,經G418篩選1週後與CD20+淋巴瘤細胞株Daudi、Raji在體外共同培養,用非放射性的細胞殺傷試劑盒和ELISA檢測試劑盒分彆檢測T細胞的抗原特異性殺傷和細胞因子分泌的功能.結果 酶切及測序鑒定均證實pLNCX/抗CD20scFv/CD80/CD28/ζ構建成功,重組基因脩飾的T細胞能在體外殺傷CD20+淋巴瘤細胞株Daudi、Raji,而對CD20-細胞株K562無殺傷作用,同時CD20+靶細胞組上清液中IL-2和IFN-γ水平與CD20-組相比明顯升高.結論 重組基因脩飾的CD20靶嚮性T細胞構建成功.該T細胞在體外能特異性殺傷CD20+淋巴瘤細胞株.
목적 구건표체항CD20scFv/CD80/CD28/ζ중조기인수식T세포,체외관찰기특이성청제CD20+림파류세포적능력,위종류적과계면역치료제공신사로.방법 채용DNA중조기술장pBULLET상적CD28-ζ cDNA삽입도이함유항CD20scFv/CD80적진핵표체재체pLNCX질립상,전염PA317포장세포,도취고적도적포장세포수획병독,용수획적병독감염자격분렬적인외주혈T림파세포,경G418사선1주후여CD20+림파류세포주Daudi、Raji재체외공동배양,용비방사성적세포살상시제합화ELISA검측시제합분별검측T세포적항원특이성살상화세포인자분비적공능.결과 매절급측서감정균증실pLNCX/항CD20scFv/CD80/CD28/ζ구건성공,중조기인수식적T세포능재체외살상CD20+림파류세포주Daudi、Raji,이대CD20-세포주K562무살상작용,동시CD20+파세포조상청액중IL-2화IFN-γ수평여CD20-조상비명현승고.결론 중조기인수식적CD20파향성T세포구건성공.해T세포재체외능특이성살상CD20+림파류세포주.
