生理学报
生理學報
생이학보
ACTA PHYSIOLOGICA SINICA
2003年
1期
71-74
,共4页
王小芳%邵颖%田德志%姚泰%陆利民
王小芳%邵穎%田德誌%姚泰%陸利民
왕소방%소영%전덕지%요태%륙이민
肾上腺髓质素%K562细胞%基因表达%脂质体
腎上腺髓質素%K562細胞%基因錶達%脂質體
신상선수질소%K562세포%기인표체%지질체
为探索通过体内表达肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM)治疗高血压和慢性心衰的可能性, 本实验构建了重组AM真核表达载体, 并在无内源性AM表达的K562细胞株上进行了体外表达实验.实验中采用RT-PCR技术扩增AM cDNA片段, 并将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1真核表达质粒, 构建成含AM cDNA的重组质粒pcDNA3.1AM.用脂质体介导将该质粒转染培养的人白血病细胞K562 株.在转染的细胞中, 用RT-PCR检测证实有AM mRNA存在; 用斑点免疫分析方法检测转染细胞的培养液上清, 证实有AM多肽存在, 表明本实验中构建的重组pcDNA3.1AM载体能够在哺乳类细胞中表达AM.
為探索通過體內錶達腎上腺髓質素(adrenomedullin, AM)治療高血壓和慢性心衰的可能性, 本實驗構建瞭重組AM真覈錶達載體, 併在無內源性AM錶達的K562細胞株上進行瞭體外錶達實驗.實驗中採用RT-PCR技術擴增AM cDNA片段, 併將擴增的cDNA片段插入pcDNA3.1真覈錶達質粒, 構建成含AM cDNA的重組質粒pcDNA3.1AM.用脂質體介導將該質粒轉染培養的人白血病細胞K562 株.在轉染的細胞中, 用RT-PCR檢測證實有AM mRNA存在; 用斑點免疫分析方法檢測轉染細胞的培養液上清, 證實有AM多肽存在, 錶明本實驗中構建的重組pcDNA3.1AM載體能夠在哺乳類細胞中錶達AM.
위탐색통과체내표체신상선수질소(adrenomedullin, AM)치료고혈압화만성심쇠적가능성, 본실험구건료중조AM진핵표체재체, 병재무내원성AM표체적K562세포주상진행료체외표체실험.실험중채용RT-PCR기술확증AM cDNA편단, 병장확증적cDNA편단삽입pcDNA3.1진핵표체질립, 구건성함AM cDNA적중조질립pcDNA3.1AM.용지질체개도장해질립전염배양적인백혈병세포K562 주.재전염적세포중, 용RT-PCR검측증실유AM mRNA존재; 용반점면역분석방법검측전염세포적배양액상청, 증실유AM다태존재, 표명본실험중구건적중조pcDNA3.1AM재체능구재포유류세포중표체AM.
