CAJ | 학술논문

为了检测小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)体外分化的拟胚体(embryoid bodies,EBs)形成过程中细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)的发生,通过悬滴、悬浮培养技术定向诱导未分化的ES细胞分化为拟胚体,并用RT-PCR检测原始内胚层、原始外胚层、中胚层、内脏内胚层4种分子标记物在EBs中的表达.通过TUNEL染色、电镜、激光共聚焦显微镜及Western印迹以确定凋亡发生.结果表明:ES细胞体外分化为拟胚体并且表达各胚层相应的分子标记物;在拟胚体的发育过程中出现明显的空腔化过程,TUNEL染色及电镜观察到凋亡生成,同时线粒体膜电位(△ψm)在拟胚体发育过程中降低,通过Western印迹检测到caspase3、caspase8的激活.表明小鼠ES细胞所分化的拟胚体可以作为研究早期胚胎发育的实验模型,线粒体在拟胚体的细胞程序性死亡过程中发挥重要的作用.为进一步利用拟胚体研究细胞程序性死亡及相关信号分子在小鼠胚胎发育早期的作用奠定了基础.
위료검측소서배태간세포(embryonic stem cell,ES세포)체외분화적의배체(embryoid bodies,EBs)형성과정중세포정서성사망(programmed cell death,PCD)적발생,통과현적、현부배양기술정향유도미분화적ES세포분화위의배체,병용RT-PCR검측원시내배층、원시외배층、중배층、내장내배층4충분자표기물재EBs중적표체.통과TUNEL염색、전경、격광공취초현미경급Western인적이학정조망발생.결과표명:ES세포체외분화위의배체병차표체각배층상응적분자표기물;재의배체적발육과정중출현명현적공강화과정,TUNEL염색급전경관찰도조망생성,동시선립체막전위(△ψm)재의배체발육과정중강저,통과Western인적검측도caspase3、caspase8적격활.표명소서ES세포소분화적의배체가이작위연구조기배태발육적실험모형,선립체재의배체적세포정서성사망과정중발휘중요적작용.위진일보이용의배체연구세포정서성사망급상관신호분자재소서배태발육조기적작용전정료기출.