军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2005年
5期
457-459,470
,共4页
胡美茹%靳宝锋%张学敏%孙瑛勋%沈倍奋
鬍美茹%靳寶鋒%張學敏%孫瑛勛%瀋倍奮
호미여%근보봉%장학민%손영훈%침배강
荧光极化%Bcl-2蛋白%Bak蛋白%BH3结构域%饱和曲线
熒光極化%Bcl-2蛋白%Bak蛋白%BH3結構域%飽和麯線
형광겁화%Bcl-2단백%Bak단백%BH3결구역%포화곡선
目的:利用荧光极化原理,在液相系统内建立基于Bcl-2/Bak相互作用模式的高通量药物筛选体系.方法:在液相系统内建立Bcl-2蛋白和多肽的相互作用体系,用光度计检测荧光极化值,分析荧光极化值随蛋白或多肽浓度变化而改变的趋势.结果:对应于Bak蛋白BH3结构域的5FAM标记肽(LP)可与Bcl-2蛋白相互作用,建立了二者相互作用的饱和曲线;非标记竞争性短肽(CP)和LP竞争性地与Bcl-2蛋白结合,而无关肽(NP)则不与Bcl-2相互作用;基于Bcl-2结构筛选到的小分子化合物SC对体系内LP荧光极化值的影响模式与CP相同.结论:在均相系统内初步建立了基于抑制Bcl-2活性进而促进细胞凋亡的药物高通量筛选方法,为实现药物的高通量筛选奠定了基础.
目的:利用熒光極化原理,在液相繫統內建立基于Bcl-2/Bak相互作用模式的高通量藥物篩選體繫.方法:在液相繫統內建立Bcl-2蛋白和多肽的相互作用體繫,用光度計檢測熒光極化值,分析熒光極化值隨蛋白或多肽濃度變化而改變的趨勢.結果:對應于Bak蛋白BH3結構域的5FAM標記肽(LP)可與Bcl-2蛋白相互作用,建立瞭二者相互作用的飽和麯線;非標記競爭性短肽(CP)和LP競爭性地與Bcl-2蛋白結閤,而無關肽(NP)則不與Bcl-2相互作用;基于Bcl-2結構篩選到的小分子化閤物SC對體繫內LP熒光極化值的影響模式與CP相同.結論:在均相繫統內初步建立瞭基于抑製Bcl-2活性進而促進細胞凋亡的藥物高通量篩選方法,為實現藥物的高通量篩選奠定瞭基礎.
목적:이용형광겁화원리,재액상계통내건립기우Bcl-2/Bak상호작용모식적고통량약물사선체계.방법:재액상계통내건립Bcl-2단백화다태적상호작용체계,용광도계검측형광겁화치,분석형광겁화치수단백혹다태농도변화이개변적추세.결과:대응우Bak단백BH3결구역적5FAM표기태(LP)가여Bcl-2단백상호작용,건립료이자상호작용적포화곡선;비표기경쟁성단태(CP)화LP경쟁성지여Bcl-2단백결합,이무관태(NP)칙불여Bcl-2상호작용;기우Bcl-2결구사선도적소분자화합물SC대체계내LP형광겁화치적영향모식여CP상동.결론:재균상계통내초보건립료기우억제Bcl-2활성진이촉진세포조망적약물고통량사선방법,위실현약물적고통량사선전정료기출.
