中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
5期
471-473,477
,共4页
羊建%刘佳佳%郑小莉%薛晓婕
羊建%劉佳佳%鄭小莉%薛曉婕
양건%류가가%정소리%설효첩
中性粒细胞%ONO-AE-248%非凋亡性程序化细胞死亡%凋亡%凋亡相关斑点样蛋白
中性粒細胞%ONO-AE-248%非凋亡性程序化細胞死亡%凋亡%凋亡相關斑點樣蛋白
중성립세포%ONO-AE-248%비조망성정서화세포사망%조망%조망상관반점양단백
目的:探讨接受ONO-AE-248刺激后重要的差异表达蛋白--凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)的表达及意义.方法:Ficoll法新鲜分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞(Polymorpho-nuclear neutrophils,PMN),与 ONO-AE-248 共同培养,2小时提取总RNA,并行反转录-PCR检测ASC mRNA的表达;12 小时提取总蛋白,双向电泳分离后,采用PDQest 2-DE软件分析找出差异表达的蛋白质斑点,并用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定.结果:ONO-AE-248刺激2小时中性粒细胞ASC mRNA的表达明显下调(P＜0.01);12小时通过双向电泳和蛋白质质谱分析发现ASC为重要的差异表达蛋白且ONO-AE-248 刺激后的表达量明显低于自发性凋亡组.结论:ONO-AE-248引起的ASC表达的下调可能是中性粒细胞凋亡和ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的关键性差异点.ONO-AE-248 显著下调 ASC 的表达,可能是ONO-AE-248诱使中性粒细胞发生非凋亡性程序化死亡的根本原因之一.
目的:探討接受ONO-AE-248刺激後重要的差異錶達蛋白--凋亡相關斑點樣蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)的錶達及意義.方法:Ficoll法新鮮分離健康誌願者外週靜脈血中性粒細胞(Polymorpho-nuclear neutrophils,PMN),與 ONO-AE-248 共同培養,2小時提取總RNA,併行反轉錄-PCR檢測ASC mRNA的錶達;12 小時提取總蛋白,雙嚮電泳分離後,採用PDQest 2-DE軟件分析找齣差異錶達的蛋白質斑點,併用基質輔助激光解吸電離飛行時間串聯質譜(MALDI-TOF-MS)進行鑒定.結果:ONO-AE-248刺激2小時中性粒細胞ASC mRNA的錶達明顯下調(P＜0.01);12小時通過雙嚮電泳和蛋白質質譜分析髮現ASC為重要的差異錶達蛋白且ONO-AE-248 刺激後的錶達量明顯低于自髮性凋亡組.結論:ONO-AE-248引起的ASC錶達的下調可能是中性粒細胞凋亡和ONO-AE-248誘導的中性粒細胞非凋亡性程序化細胞死亡的關鍵性差異點.ONO-AE-248 顯著下調 ASC 的錶達,可能是ONO-AE-248誘使中性粒細胞髮生非凋亡性程序化死亡的根本原因之一.
목적:탐토접수ONO-AE-248자격후중요적차이표체단백--조망상관반점양단백(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)적표체급의의.방법:Ficoll법신선분리건강지원자외주정맥혈중성립세포(Polymorpho-nuclear neutrophils,PMN),여 ONO-AE-248 공동배양,2소시제취총RNA,병행반전록-PCR검측ASC mRNA적표체;12 소시제취총단백,쌍향전영분리후,채용PDQest 2-DE연건분석조출차이표체적단백질반점,병용기질보조격광해흡전리비행시간천련질보(MALDI-TOF-MS)진행감정.결과:ONO-AE-248자격2소시중성립세포ASC mRNA적표체명현하조(P＜0.01);12소시통과쌍향전영화단백질질보분석발현ASC위중요적차이표체단백차ONO-AE-248 자격후적표체량명현저우자발성조망조.결론:ONO-AE-248인기적ASC표체적하조가능시중성립세포조망화ONO-AE-248유도적중성립세포비조망성정서화세포사망적관건성차이점.ONO-AE-248 현저하조 ASC 적표체,가능시ONO-AE-248유사중성립세포발생비조망성정서화사망적근본원인지일.
