药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2003年
3期
129-132
,共4页
杨芳%刘红岩%徐维明%肖红剑%龙海亭%李珺%刘云丽
楊芳%劉紅巖%徐維明%肖紅劍%龍海亭%李珺%劉雲麗
양방%류홍암%서유명%초홍검%룡해정%리군%류운려
TRAIL%基因克隆%原核表达
TRAIL%基因剋隆%原覈錶達
TRAIL%기인극륭%원핵표체
克隆TRAIL基因的95-281位(sTRAIL),构建表达载体,建立原核表达体系,优化诱导表达的条件.分离人外周血淋巴细胞,提取总RNA,RT-PCR,克隆sTRAIL的cDNA,构建原核表达载体,优化IPTG诱导的条件.结果:(1)克隆了TRAIL基因95-281位的cDNA,DNA测序结果与报道的一致.(2)构建了sTRAIL基因的原核表达载体,酶切结果与预期的一致.(3)转化宿主菌,优化IPTG诱导条件,发现3mmol/L,诱导3～4h表达最好.sTRAIL基因的克隆及表达为下游中试发酵及纯化奠定了上游的基础,也为研究TRAIL抗肿瘤的机制提供了可能.
剋隆TRAIL基因的95-281位(sTRAIL),構建錶達載體,建立原覈錶達體繫,優化誘導錶達的條件.分離人外週血淋巴細胞,提取總RNA,RT-PCR,剋隆sTRAIL的cDNA,構建原覈錶達載體,優化IPTG誘導的條件.結果:(1)剋隆瞭TRAIL基因95-281位的cDNA,DNA測序結果與報道的一緻.(2)構建瞭sTRAIL基因的原覈錶達載體,酶切結果與預期的一緻.(3)轉化宿主菌,優化IPTG誘導條件,髮現3mmol/L,誘導3～4h錶達最好.sTRAIL基因的剋隆及錶達為下遊中試髮酵及純化奠定瞭上遊的基礎,也為研究TRAIL抗腫瘤的機製提供瞭可能.
극륭TRAIL기인적95-281위(sTRAIL),구건표체재체,건립원핵표체체계,우화유도표체적조건.분리인외주혈림파세포,제취총RNA,RT-PCR,극륭sTRAIL적cDNA,구건원핵표체재체,우화IPTG유도적조건.결과:(1)극륭료TRAIL기인95-281위적cDNA,DNA측서결과여보도적일치.(2)구건료sTRAIL기인적원핵표체재체,매절결과여예기적일치.(3)전화숙주균,우화IPTG유도조건,발현3mmol/L,유도3～4h표체최호.sTRAIL기인적극륭급표체위하유중시발효급순화전정료상유적기출,야위연구TRAIL항종류적궤제제공료가능.
