浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2005年
3期
223-229
,共7页
抗体,细菌/分析%cagA基因%基因表达%抗原,细菌%克隆,分子%螺杆菌,幽门/免疫学%螺杆菌,幽门/遗传学%免疫性%细菌蛋白质类/遗传学
抗體,細菌/分析%cagA基因%基因錶達%抗原,細菌%剋隆,分子%螺桿菌,幽門/免疫學%螺桿菌,幽門/遺傳學%免疫性%細菌蛋白質類/遺傳學
항체,세균/분석%cagA기인%기인표체%항원,세균%극륭,분자%라간균,유문/면역학%라간균,유문/유전학%면역성%세균단백질류/유전학
目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)cagA基因片段的原核表达系统,建立ELISA检测CagA及其抗体,了解表达CagA的Hp菌株(CagA+Hp)感染与所致疾病种类的关系.方法:从快速尿素酶试验阳性的156例患者胃黏膜活检标本中分离Hp.采用PCR检测109株Hp cagA基因,并从临床菌株Y06中扩增2 148 bp的cagA基因片段(cagA1).构建cagA1原核表达系统,用SDS-PAGE检查目的重组蛋白(rCagA1)的表达情况,用Western blot和免疫双扩散试验鉴定rCagA1的免疫反应性和抗原性.建立ELISA,检测109株Hp CagA表达和相应患者血清中CagA抗体.分析CagA+ Hp感染与胃炎和消化性溃疡的关系.结果:80.8%胃黏膜活检标本中分离出Hp(126/156),97.2%的Hp菌株(106/109)cagA基因阳性.与文献报道比较,所克隆的cagA1片段核苷酸和氨基酸序列同源性分别为94.83%和93.30%.所构建的原核表达系统表达的rCagA1量约为细菌总蛋白的30.0%.rCagA1能与Hp全菌抗体发生结合反应,免疫家兔产生双扩散效价为1∶4的抗体.92.6%菌株(101/109)可表达CagA,88.1% 患者(96/109)血清CagA抗体阳性.消化性溃疡标本中CagA+ Hp菌株分离阳性率(97.9%)高于胃炎标本(88.5%),但无统计学差异(χ2=3.48,P>0.05).结论:本实验构建的原核表达系统表达的rCagA1有良好的免疫反应性和抗原性,建立的ELISA可用于Hp CagA及其抗体的检测,分离的Hp菌株cagA基因携带率和CagA表达率均很高.消化性溃疡和胃炎与其感染的Hp是否表达CagA无明显关系.
目的:構建幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)cagA基因片段的原覈錶達繫統,建立ELISA檢測CagA及其抗體,瞭解錶達CagA的Hp菌株(CagA+Hp)感染與所緻疾病種類的關繫.方法:從快速尿素酶試驗暘性的156例患者胃黏膜活檢標本中分離Hp.採用PCR檢測109株Hp cagA基因,併從臨床菌株Y06中擴增2 148 bp的cagA基因片段(cagA1).構建cagA1原覈錶達繫統,用SDS-PAGE檢查目的重組蛋白(rCagA1)的錶達情況,用Western blot和免疫雙擴散試驗鑒定rCagA1的免疫反應性和抗原性.建立ELISA,檢測109株Hp CagA錶達和相應患者血清中CagA抗體.分析CagA+ Hp感染與胃炎和消化性潰瘍的關繫.結果:80.8%胃黏膜活檢標本中分離齣Hp(126/156),97.2%的Hp菌株(106/109)cagA基因暘性.與文獻報道比較,所剋隆的cagA1片段覈苷痠和氨基痠序列同源性分彆為94.83%和93.30%.所構建的原覈錶達繫統錶達的rCagA1量約為細菌總蛋白的30.0%.rCagA1能與Hp全菌抗體髮生結閤反應,免疫傢兔產生雙擴散效價為1∶4的抗體.92.6%菌株(101/109)可錶達CagA,88.1% 患者(96/109)血清CagA抗體暘性.消化性潰瘍標本中CagA+ Hp菌株分離暘性率(97.9%)高于胃炎標本(88.5%),但無統計學差異(χ2=3.48,P>0.05).結論:本實驗構建的原覈錶達繫統錶達的rCagA1有良好的免疫反應性和抗原性,建立的ELISA可用于Hp CagA及其抗體的檢測,分離的Hp菌株cagA基因攜帶率和CagA錶達率均很高.消化性潰瘍和胃炎與其感染的Hp是否錶達CagA無明顯關繫.
목적:구건유문라간균(Helicobacter pylori,Hp)cagA기인편단적원핵표체계통,건립ELISA검측CagA급기항체,료해표체CagA적Hp균주(CagA+Hp)감염여소치질병충류적관계.방법:종쾌속뇨소매시험양성적156례환자위점막활검표본중분리Hp.채용PCR검측109주Hp cagA기인,병종림상균주Y06중확증2 148 bp적cagA기인편단(cagA1).구건cagA1원핵표체계통,용SDS-PAGE검사목적중조단백(rCagA1)적표체정황,용Western blot화면역쌍확산시험감정rCagA1적면역반응성화항원성.건립ELISA,검측109주Hp CagA표체화상응환자혈청중CagA항체.분석CagA+ Hp감염여위염화소화성궤양적관계.결과:80.8%위점막활검표본중분리출Hp(126/156),97.2%적Hp균주(106/109)cagA기인양성.여문헌보도비교,소극륭적cagA1편단핵감산화안기산서렬동원성분별위94.83%화93.30%.소구건적원핵표체계통표체적rCagA1량약위세균총단백적30.0%.rCagA1능여Hp전균항체발생결합반응,면역가토산생쌍확산효개위1∶4적항체.92.6%균주(101/109)가표체CagA,88.1% 환자(96/109)혈청CagA항체양성.소화성궤양표본중CagA+ Hp균주분리양성솔(97.9%)고우위염표본(88.5%),단무통계학차이(χ2=3.48,P>0.05).결론:본실험구건적원핵표체계통표체적rCagA1유량호적면역반응성화항원성,건립적ELISA가용우Hp CagA급기항체적검측,분리적Hp균주cagA기인휴대솔화CagA표체솔균흔고.소화성궤양화위염여기감염적Hp시부표체CagA무명현관계.
