微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2005年
5期
792-794
,共3页
邵金辉%赵云%毛爱军%朱雅新%董志扬%江宁
邵金輝%趙雲%毛愛軍%硃雅新%董誌颺%江寧
소금휘%조운%모애군%주아신%동지양%강저
扣囊复膜孢酵母%β-葡萄糖苷酶%巴斯德毕氏酵母%表达
釦囊複膜孢酵母%β-葡萄糖苷酶%巴斯德畢氏酵母%錶達
구낭복막포효모%β-포도당감매%파사덕필씨효모%표체
利用PCR技术,从扣囊复膜孢酵母的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因(BGL1),长度为2596 bp,连接到pGEM-T载体上,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,使之位于α-因子信号肽下游,且与之同框,构建成重组质粒pSHL9K.通过电转化将重组质粒pSHL9K插入到Pichia pastoris GS115菌株染色体中,获得高效表达BGL1基因的毕赤酵母重组工程菌株.重组酶的最适温度为50℃,最适pH为5.4.培养基中β-葡萄糖苷酶活性最高可达47U/mL.
利用PCR技術,從釦囊複膜孢酵母的總DNA中擴增得到β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因(BGL1),長度為2596 bp,連接到pGEM-T載體上,用限製性內切酶切下目的基因,插入到巴斯德畢赤酵母錶達載體pPIC9K中,使之位于α-因子信號肽下遊,且與之同框,構建成重組質粒pSHL9K.通過電轉化將重組質粒pSHL9K插入到Pichia pastoris GS115菌株染色體中,穫得高效錶達BGL1基因的畢赤酵母重組工程菌株.重組酶的最適溫度為50℃,最適pH為5.4.培養基中β-葡萄糖苷酶活性最高可達47U/mL.
이용PCR기술,종구낭복막포효모적총DNA중확증득도β-포도당감매(β-Glucosidase)기인(BGL1),장도위2596 bp,련접도pGEM-T재체상,용한제성내절매절하목적기인,삽입도파사덕필적효모표체재체pPIC9K중,사지위우α-인자신호태하유,차여지동광,구건성중조질립pSHL9K.통과전전화장중조질립pSHL9K삽입도Pichia pastoris GS115균주염색체중,획득고효표체BGL1기인적필적효모중조공정균주.중조매적최괄온도위50℃,최괄pH위5.4.배양기중β-포도당감매활성최고가체47U/mL.
