药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2005年
6期
351-353
,共3页
李欣燕%许瑞安%王广基%马宏%谢海棠%赵小辰%陈淼
李訢燕%許瑞安%王廣基%馬宏%謝海棠%趙小辰%陳淼
리흔연%허서안%왕엄기%마굉%사해당%조소신%진묘
星状细胞激活相关蛋白%腺相关病毒
星狀細胞激活相關蛋白%腺相關病毒
성상세포격활상관단백%선상관병독
克隆大鼠星状细胞激活相关蛋白(Stellate Cell Activation associated Protein,STAP)基因,构建其重组腺相关病毒载体(rAAV-STAP),为进一步研究STAP基因功能提供有效工具.用RT PCR法从大鼠肝组织中扩增出大鼠STAP基因,将STAP cDNA插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pAM/CAG中,构建重组质粒pAM/CAG-STAP.以磷酸钙共转染法将pAM/CAG-STAP及辅助质粒pAd/H22转染293细胞,经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺相关病毒rAAV-STAP.ELISA法测定病毒滴度,Western blot法检测重组病毒感染293细胞后STAP的表达情况.实验结果表明,RT-PCR法从大鼠肝组织中扩增出573bp cDNA,测序证实为大鼠STAP基因.Western blot法证实rAAV-STAP感染293细胞后可在细胞内表达STAP.
剋隆大鼠星狀細胞激活相關蛋白(Stellate Cell Activation associated Protein,STAP)基因,構建其重組腺相關病毒載體(rAAV-STAP),為進一步研究STAP基因功能提供有效工具.用RT PCR法從大鼠肝組織中擴增齣大鼠STAP基因,將STAP cDNA插入腺相關病毒(AAV)錶達質粒pAM/CAG中,構建重組質粒pAM/CAG-STAP.以燐痠鈣共轉染法將pAM/CAG-STAP及輔助質粒pAd/H22轉染293細胞,經293細胞包裝後得到複製缺陷型重組腺相關病毒rAAV-STAP.ELISA法測定病毒滴度,Western blot法檢測重組病毒感染293細胞後STAP的錶達情況.實驗結果錶明,RT-PCR法從大鼠肝組織中擴增齣573bp cDNA,測序證實為大鼠STAP基因.Western blot法證實rAAV-STAP感染293細胞後可在細胞內錶達STAP.
극륭대서성상세포격활상관단백(Stellate Cell Activation associated Protein,STAP)기인,구건기중조선상관병독재체(rAAV-STAP),위진일보연구STAP기인공능제공유효공구.용RT PCR법종대서간조직중확증출대서STAP기인,장STAP cDNA삽입선상관병독(AAV)표체질립pAM/CAG중,구건중조질립pAM/CAG-STAP.이린산개공전염법장pAM/CAG-STAP급보조질립pAd/H22전염293세포,경293세포포장후득도복제결함형중조선상관병독rAAV-STAP.ELISA법측정병독적도,Western blot법검측중조병독감염293세포후STAP적표체정황.실험결과표명,RT-PCR법종대서간조직중확증출573bp cDNA,측서증실위대서STAP기인.Western blot법증실rAAV-STAP감염293세포후가재세포내표체STAP.
