武汉大学学报（医学版）
武漢大學學報（醫學版）
무한대학학보（의학판）
MEDICAL JOURNAL WUHAN UNIVERSITY
2006年
6期
691-694
,共4页
刘焰%彭剑虹%马立新%刘君炎%曹晓春
劉燄%彭劍虹%馬立新%劉君炎%曹曉春
류염%팽검홍%마립신%류군염%조효춘
结核杆菌%Ag85B%白细胞介素2%双顺反子
結覈桿菌%Ag85B%白細胞介素2%雙順反子
결핵간균%Ag85B%백세포개소2%쌍순반자
目的:构建结核分枝杆菌Ag85B与白细胞介素2(IL-2)双顺反子真核表达质粒.方法:以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过PCR扩增出Ag85B基因.采用亚克隆的技术从pcDNA3.1-IL-2中获得小鼠IL-2基因的cDNA片段.将两者分别定向插入真核双表达载体pIRES,构建表达两个目基因的双顺反子重组质粒, 然后用脂质体包裹体外转染A549细胞,RT-PCR检测Ag85B及IL-2的表达.结果: 酶切分析及序列测定证实重组质粒构建正确;该重组质粒能在体外表达Ag85B及IL-2 mRNA.结论:成功构建了结核杆菌Ag85B及IL-2基因双顺反子真核表达质粒,为进一步在整体动物水平的实验研究奠定了基础.
目的:構建結覈分枝桿菌Ag85B與白細胞介素2(IL-2)雙順反子真覈錶達質粒.方法:以結覈桿菌H37Rv基因組DNA為模闆,通過PCR擴增齣Ag85B基因.採用亞剋隆的技術從pcDNA3.1-IL-2中穫得小鼠IL-2基因的cDNA片段.將兩者分彆定嚮插入真覈雙錶達載體pIRES,構建錶達兩箇目基因的雙順反子重組質粒, 然後用脂質體包裹體外轉染A549細胞,RT-PCR檢測Ag85B及IL-2的錶達.結果: 酶切分析及序列測定證實重組質粒構建正確;該重組質粒能在體外錶達Ag85B及IL-2 mRNA.結論:成功構建瞭結覈桿菌Ag85B及IL-2基因雙順反子真覈錶達質粒,為進一步在整體動物水平的實驗研究奠定瞭基礎.
목적:구건결핵분지간균Ag85B여백세포개소2(IL-2)쌍순반자진핵표체질립.방법:이결핵간균H37Rv기인조DNA위모판,통과PCR확증출Ag85B기인.채용아극륭적기술종pcDNA3.1-IL-2중획득소서IL-2기인적cDNA편단.장량자분별정향삽입진핵쌍표체재체pIRES,구건표체량개목기인적쌍순반자중조질립, 연후용지질체포과체외전염A549세포,RT-PCR검측Ag85B급IL-2적표체.결과: 매절분석급서렬측정증실중조질립구건정학;해중조질립능재체외표체Ag85B급IL-2 mRNA.결론:성공구건료결핵간균Ag85B급IL-2기인쌍순반자진핵표체질립,위진일보재정체동물수평적실험연구전정료기출.
