华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2008年
3期
13-15
,共3页
苦瓜%MAP30%载体构建%PCR
苦瓜%MAP30%載體構建%PCR
고과%MAP30%재체구건%PCR
首先提取苦瓜的基因组DNA,然后根据Genbank中已公开发表的MAP30序列,设计一对特异引物MAP301,MAP302,并增添特异定位于内质网的小肽Kozak序列.采用PCR技术,从苦瓜的基因组DNA中扩增出一分子量为800bp左右的片段,回收克隆测序,结果表明,克隆获得片段与已公开发表的MAP30序列同源性达100%,将阳性克隆进行酶切,获得的目标片段与用同样酶切所获得的植物表达载体pEV1和pEV2大片段连接,酶切鉴定重组子构建成特异表达于果实的载体.
首先提取苦瓜的基因組DNA,然後根據Genbank中已公開髮錶的MAP30序列,設計一對特異引物MAP301,MAP302,併增添特異定位于內質網的小肽Kozak序列.採用PCR技術,從苦瓜的基因組DNA中擴增齣一分子量為800bp左右的片段,迴收剋隆測序,結果錶明,剋隆穫得片段與已公開髮錶的MAP30序列同源性達100%,將暘性剋隆進行酶切,穫得的目標片段與用同樣酶切所穫得的植物錶達載體pEV1和pEV2大片段連接,酶切鑒定重組子構建成特異錶達于果實的載體.
수선제취고과적기인조DNA,연후근거Genbank중이공개발표적MAP30서렬,설계일대특이인물MAP301,MAP302,병증첨특이정위우내질망적소태Kozak서렬.채용PCR기술,종고과적기인조DNA중확증출일분자량위800bp좌우적편단,회수극륭측서,결과표명,극륭획득편단여이공개발표적MAP30서렬동원성체100%,장양성극륭진행매절,획득적목표편단여용동양매절소획득적식물표체재체pEV1화pEV2대편단련접,매절감정중조자구건성특이표체우과실적재체.
