热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2008年
9期
893-896,910
,共5页
洪迅%刘培庆%粱杰贤%付云
洪迅%劉培慶%粱傑賢%付雲
홍신%류배경%량걸현%부운
肝癌%三羟异黄酮%p53%细胞周期%细胞凋亡
肝癌%三羥異黃酮%p53%細胞週期%細胞凋亡
간암%삼간이황동%p53%세포주기%세포조망
目的 探讨三羟异黄酮(genistein)诱导肝癌细胞凋亡过程中p53信号通路的调控机制.方法 MTT法检测Genistein对肝癌HepG2细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测Genistein诱导的细胞周期变化和凋亡率,应用荧光底物法检测Caspase-3活性,Western blotting分析细胞p53蛋白、p21和Bax蛋白表达.结果 MTT法检测表明.随着药物剂量的增加和作用时间延长,Genistein对HepG2的杀伤效果亦增加;细胞周期研究表明,Genistein能够阻滞细胞周期于G2/M期,随着药物处理浓度的增加,HepG2细胞处于C2/M期细胞的比例由对照组的(22.9±1.6)%增加到80 μmol/L处理组的(63.8±2.4)%,各处理组G2/M期比例和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);凋亡研究和Caspase-3活性分析表明,Genistein能够显著诱导HepG2细胞凋亡,且具有作用时间依赖效应.随着药物作用时间延长,HepG2凋亡细胞比例由对照组的(1.6±0.5)%增加到72 h处理组的(30.7±5.6)%,各处理时点凋亡细胞比例和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).Caspase-3活性检测结果表明,Caspase-3相对活性随药物处理浓度增加而出现显著上调,由对照组的(100±2.5)%增加到80 μmol/L处理组的(225.1±21.2)%.各处理组Caspase-3相对活性和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western Blotting检测表明,随着Genistein作用时间的延长,磷酸化p53水平上升,且p21和Bax水平上调.结论 Genistein能通过抑制磷酸肌醇信号通路,上调磷酸化p53蛋白水平.激活其下游信号通路分子如p21和Bax的表达,从而阻滞细胞周期于G2/M期,并通过活化Caspase-3诱导肝癌细胞凋亡.
目的 探討三羥異黃酮(genistein)誘導肝癌細胞凋亡過程中p53信號通路的調控機製.方法 MTT法檢測Genistein對肝癌HepG2細胞的殺傷作用,流式細胞儀檢測Genistein誘導的細胞週期變化和凋亡率,應用熒光底物法檢測Caspase-3活性,Western blotting分析細胞p53蛋白、p21和Bax蛋白錶達.結果 MTT法檢測錶明.隨著藥物劑量的增加和作用時間延長,Genistein對HepG2的殺傷效果亦增加;細胞週期研究錶明,Genistein能夠阻滯細胞週期于G2/M期,隨著藥物處理濃度的增加,HepG2細胞處于C2/M期細胞的比例由對照組的(22.9±1.6)%增加到80 μmol/L處理組的(63.8±2.4)%,各處理組G2/M期比例和對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05);凋亡研究和Caspase-3活性分析錶明,Genistein能夠顯著誘導HepG2細胞凋亡,且具有作用時間依賴效應.隨著藥物作用時間延長,HepG2凋亡細胞比例由對照組的(1.6±0.5)%增加到72 h處理組的(30.7±5.6)%,各處理時點凋亡細胞比例和對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05).Caspase-3活性檢測結果錶明,Caspase-3相對活性隨藥物處理濃度增加而齣現顯著上調,由對照組的(100±2.5)%增加到80 μmol/L處理組的(225.1±21.2)%.各處理組Caspase-3相對活性和對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05);Western Blotting檢測錶明,隨著Genistein作用時間的延長,燐痠化p53水平上升,且p21和Bax水平上調.結論 Genistein能通過抑製燐痠肌醇信號通路,上調燐痠化p53蛋白水平.激活其下遊信號通路分子如p21和Bax的錶達,從而阻滯細胞週期于G2/M期,併通過活化Caspase-3誘導肝癌細胞凋亡.
목적 탐토삼간이황동(genistein)유도간암세포조망과정중p53신호통로적조공궤제.방법 MTT법검측Genistein대간암HepG2세포적살상작용,류식세포의검측Genistein유도적세포주기변화화조망솔,응용형광저물법검측Caspase-3활성,Western blotting분석세포p53단백、p21화Bax단백표체.결과 MTT법검측표명.수착약물제량적증가화작용시간연장,Genistein대HepG2적살상효과역증가;세포주기연구표명,Genistein능구조체세포주기우G2/M기,수착약물처리농도적증가,HepG2세포처우C2/M기세포적비례유대조조적(22.9±1.6)%증가도80 μmol/L처리조적(63.8±2.4)%,각처리조G2/M기비례화대조조비교차이균유통계학의의(P<0.05);조망연구화Caspase-3활성분석표명,Genistein능구현저유도HepG2세포조망,차구유작용시간의뢰효응.수착약물작용시간연장,HepG2조망세포비례유대조조적(1.6±0.5)%증가도72 h처리조적(30.7±5.6)%,각처리시점조망세포비례화대조조비교차이균유통계학의의(P<0.05).Caspase-3활성검측결과표명,Caspase-3상대활성수약물처리농도증가이출현현저상조,유대조조적(100±2.5)%증가도80 μmol/L처리조적(225.1±21.2)%.각처리조Caspase-3상대활성화대조조비교차이균유통계학의의(P<0.05);Western Blotting검측표명,수착Genistein작용시간적연장,린산화p53수평상승,차p21화Bax수평상조.결론 Genistein능통과억제린산기순신호통로,상조린산화p53단백수평.격활기하유신호통로분자여p21화Bax적표체,종이조체세포주기우G2/M기,병통과활화Caspase-3유도간암세포조망.
