畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2009年
9期
1320-1326
,共7页
廖文艳%马得莹%王瑞琴%韩宗玺%邵昙昊%李慧昕%刘胜旺
廖文豔%馬得瑩%王瑞琴%韓宗璽%邵曇昊%李慧昕%劉勝旺
료문염%마득형%왕서금%한종새%소담호%리혜흔%류성왕
鸭%AvBD10%重组蛋白%抗菌活性
鴨%AvBD10%重組蛋白%抗菌活性
압%AvBD10%중조단백%항균활성
旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性.试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD10,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性.结果表明,鸭AvBD10 cDNA大小为169bp,编码55个氨基酸残基,与鸡AvBD10氨基酸同源性为85.5%.该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达.重组鸭AvBD10融合蛋白的分子量约为30 ku,重组蛋白占菌体总蛋白的34%.重组鸭AvBD10蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抗菌活性.结果,从鸭肝脏组织中扩增了鸭AvBD10基因,该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达.重组鸭AvBD10融合蛋白具有广谱抗菌活性,该重组蛋白对温度和酸碱度有很高的稳定性.
旨在從鴨肝髒組織中剋隆鴨β-防禦素10(AvBD10)基因,併在原覈錶達重組鴨AvBD10蛋白,研究重組鴨AvBD10蛋白的體外抗菌活性與理化特性.試驗採用RT-PCR法,從鴨肝髒組織中擴增鴨AvBD10基因,測定該基因在鴨各組織器官中的分佈;將鴨AvBD10基因剋隆到大腸桿菌原覈錶達載體pGEX-6p-1上,構建重組錶達質粒pGEX-duck AvBD10,將重組質粒轉化大腸桿菌BL21,用IPTG誘導錶達;親和層析純化蛋白,利用薄層平皿瓊脂糖孔穴擴散法測定重組鴨AvBD10蛋白的體外抗菌活性與理化特性.結果錶明,鴨AvBD10 cDNA大小為169bp,編碼55箇氨基痠殘基,與鷄AvBD10氨基痠同源性為85.5%.該基因僅在不同日齡鴨肝髒與腎髒組織中大量錶達.重組鴨AvBD10融閤蛋白的分子量約為30 ku,重組蛋白佔菌體總蛋白的34%.重組鴨AvBD10蛋白對多殺性巴氏桿菌、金黃色葡萄毬菌和枯草芽孢桿菌有抗菌活性.結果,從鴨肝髒組織中擴增瞭鴨AvBD10基因,該基因僅在不同日齡鴨肝髒與腎髒組織中大量錶達.重組鴨AvBD10融閤蛋白具有廣譜抗菌活性,該重組蛋白對溫度和痠堿度有很高的穩定性.
지재종압간장조직중극륭압β-방어소10(AvBD10)기인,병재원핵표체중조압AvBD10단백,연구중조압AvBD10단백적체외항균활성여이화특성.시험채용RT-PCR법,종압간장조직중확증압AvBD10기인,측정해기인재압각조직기관중적분포;장압AvBD10기인극륭도대장간균원핵표체재체pGEX-6p-1상,구건중조표체질립pGEX-duck AvBD10,장중조질립전화대장간균BL21,용IPTG유도표체;친화층석순화단백,이용박층평명경지당공혈확산법측정중조압AvBD10단백적체외항균활성여이화특성.결과표명,압AvBD10 cDNA대소위169bp,편마55개안기산잔기,여계AvBD10안기산동원성위85.5%.해기인부재불동일령압간장여신장조직중대량표체.중조압AvBD10융합단백적분자량약위30 ku,중조단백점균체총단백적34%.중조압AvBD10단백대다살성파씨간균、금황색포도구균화고초아포간균유항균활성.결과,종압간장조직중확증료압AvBD10기인,해기인부재불동일령압간장여신장조직중대량표체.중조압AvBD10융합단백구유엄보항균활성,해중조단백대온도화산감도유흔고적은정성.
