南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
11期
2505-2508,2515
,共5页
周忠江%叶海燕%崔凯%王玉筵
週忠江%葉海燕%崔凱%王玉筵
주충강%협해연%최개%왕옥연
超声照射%微泡空化%基因转染%细胞骨架%细胞膜流动性
超聲照射%微泡空化%基因轉染%細胞骨架%細胞膜流動性
초성조사%미포공화%기인전염%세포골가%세포막류동성
目的 初步探讨超声介导声学微泡"空化效应"对鼠肺微血管内皮细胞基因转染的影响及其作用机制.方法 6孔板培养鼠肺微血管内皮细胞,加20μg报告基因质粒EGFP及10%白蛋白微泡(全氟显),连续波超声照射进行微泡"空化",观察不同照射时间相同机械指数(MI=1.0)(A组:30 s;B组:60 s;C组:90 s;D组:120 s;E组:180 s)及不同MI相同照射时间(60 s)(B1组:MI 0.5;B2组:MI 0.75;B3组:MI 1.0;B4组:MI 1.5;B5组:MI 1.8)报告基因转染情况.以激光共聚焦观察细胞膜膜流动性、免疫荧光观察细胞微管蛋白及微丝蛋白.结果 反应细胞膜流动性的荧光恢复强度分别为A组0.173±0.013、B组0.250±0.037、C组0.364±0.022、D组0.381±0.019、E组0.395±0.009(与A组相比,P＜0.01);B1组0.171±0.017、B2组0.255±0.026、B3组0.378±0.007、B4组0.382±0.009、B5组0.397±0.008(与Bl组相比,P＜0.01).反应细胞微管蛋白变化的荧光强度分别为A组159.15±4.79、B组188.23±6.20、C组205.80±4.48、D组208.99±8.34、E组213.70±5.09(与A组相比,P＜0.01);B1组176.84±3.10、B2组187.57±14.52、B3组206.41±11.66、B4组220.12±13.39、B5组221.16±12.78(与B1组相比,P＜0.01);各组微丝蛋白结构完整,无断裂及紊乱,荧光强度差别无统计学差异.结论 超声介导微泡空化能增加基因转染率,对细胞骨架无明显损伤;当MI为1.0时,随照时延长细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光强度增强;当照射时间为60 s,随MI增高细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光增强,但两种条件下均存在一定阈值;微丝蛋白荧光强度不随超声照射模式而改变.
目的 初步探討超聲介導聲學微泡"空化效應"對鼠肺微血管內皮細胞基因轉染的影響及其作用機製.方法 6孔闆培養鼠肺微血管內皮細胞,加20μg報告基因質粒EGFP及10%白蛋白微泡(全氟顯),連續波超聲照射進行微泡"空化",觀察不同照射時間相同機械指數(MI=1.0)(A組:30 s;B組:60 s;C組:90 s;D組:120 s;E組:180 s)及不同MI相同照射時間(60 s)(B1組:MI 0.5;B2組:MI 0.75;B3組:MI 1.0;B4組:MI 1.5;B5組:MI 1.8)報告基因轉染情況.以激光共聚焦觀察細胞膜膜流動性、免疫熒光觀察細胞微管蛋白及微絲蛋白.結果 反應細胞膜流動性的熒光恢複彊度分彆為A組0.173±0.013、B組0.250±0.037、C組0.364±0.022、D組0.381±0.019、E組0.395±0.009(與A組相比,P＜0.01);B1組0.171±0.017、B2組0.255±0.026、B3組0.378±0.007、B4組0.382±0.009、B5組0.397±0.008(與Bl組相比,P＜0.01).反應細胞微管蛋白變化的熒光彊度分彆為A組159.15±4.79、B組188.23±6.20、C組205.80±4.48、D組208.99±8.34、E組213.70±5.09(與A組相比,P＜0.01);B1組176.84±3.10、B2組187.57±14.52、B3組206.41±11.66、B4組220.12±13.39、B5組221.16±12.78(與B1組相比,P＜0.01);各組微絲蛋白結構完整,無斷裂及紊亂,熒光彊度差彆無統計學差異.結論 超聲介導微泡空化能增加基因轉染率,對細胞骨架無明顯損傷;噹MI為1.0時,隨照時延長細胞膜流動性及細胞骨架微管蛋白熒光彊度增彊;噹照射時間為60 s,隨MI增高細胞膜流動性及細胞骨架微管蛋白熒光增彊,但兩種條件下均存在一定閾值;微絲蛋白熒光彊度不隨超聲照射模式而改變.
목적 초보탐토초성개도성학미포"공화효응"대서폐미혈관내피세포기인전염적영향급기작용궤제.방법 6공판배양서폐미혈관내피세포,가20μg보고기인질립EGFP급10%백단백미포(전불현),련속파초성조사진행미포"공화",관찰불동조사시간상동궤계지수(MI=1.0)(A조:30 s;B조:60 s;C조:90 s;D조:120 s;E조:180 s)급불동MI상동조사시간(60 s)(B1조:MI 0.5;B2조:MI 0.75;B3조:MI 1.0;B4조:MI 1.5;B5조:MI 1.8)보고기인전염정황.이격광공취초관찰세포막막류동성、면역형광관찰세포미관단백급미사단백.결과 반응세포막류동성적형광회복강도분별위A조0.173±0.013、B조0.250±0.037、C조0.364±0.022、D조0.381±0.019、E조0.395±0.009(여A조상비,P＜0.01);B1조0.171±0.017、B2조0.255±0.026、B3조0.378±0.007、B4조0.382±0.009、B5조0.397±0.008(여Bl조상비,P＜0.01).반응세포미관단백변화적형광강도분별위A조159.15±4.79、B조188.23±6.20、C조205.80±4.48、D조208.99±8.34、E조213.70±5.09(여A조상비,P＜0.01);B1조176.84±3.10、B2조187.57±14.52、B3조206.41±11.66、B4조220.12±13.39、B5조221.16±12.78(여B1조상비,P＜0.01);각조미사단백결구완정,무단렬급문란,형광강도차별무통계학차이.결론 초성개도미포공화능증가기인전염솔,대세포골가무명현손상;당MI위1.0시,수조시연장세포막류동성급세포골가미관단백형광강도증강;당조사시간위60 s,수MI증고세포막류동성급세포골가미관단백형광증강,단량충조건하균존재일정역치;미사단백형광강도불수초성조사모식이개변.
