医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2011年
1期
32-35
,共4页
潘炜松%代辉%张业%沈珝琲
潘煒鬆%代輝%張業%瀋珝琲
반위송%대휘%장업%침후배
SET7/9%肌肉分化%RNA干扰%myogenin
SET7/9%肌肉分化%RNA榦擾%myogenin
SET7/9%기육분화%RNA간우%myogenin
目的 利用本组构建的小鼠组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET7/9真核表达质粒及RNA干扰(siRNA)质粒,在体外成肌细胞分化模型C2C12细胞中检测SET7/9对肌肉分化关键基因myogenin基因表达的影响.方法 转染SET7/9真核表达质粒pCMV-3tag-6-SET7/9 至C2C12细胞,Western blot技术验证其表达;利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测SET7/9对myogenin基因mRNA水平的影响;利用双荧光素酶报告系统检测SET7/9对myogenin基因启动子活性的影响;转染SET7/9的siRNA质粒,利用Real-time PCR技术检测其抑制效果以及对myogenin mRNA水平的影响.结果 SET7/9真核表达质粒pCMV-3tag-6-SET7/9可在C2C12细胞中有效表达; SET7/9可使myogenin mRNA水平升高并能够促进myogenin启动子活性升高;干扰SET7/9表达可使myogenin mRNA水平降低.结论 组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET7/9可激活肌肉分化关键基因myogenin的转录.
目的 利用本組構建的小鼠組蛋白賴氨痠甲基轉移酶SET7/9真覈錶達質粒及RNA榦擾(siRNA)質粒,在體外成肌細胞分化模型C2C12細胞中檢測SET7/9對肌肉分化關鍵基因myogenin基因錶達的影響.方法 轉染SET7/9真覈錶達質粒pCMV-3tag-6-SET7/9 至C2C12細胞,Western blot技術驗證其錶達;利用實時熒光定量PCR(Real-time PCR)技術檢測SET7/9對myogenin基因mRNA水平的影響;利用雙熒光素酶報告繫統檢測SET7/9對myogenin基因啟動子活性的影響;轉染SET7/9的siRNA質粒,利用Real-time PCR技術檢測其抑製效果以及對myogenin mRNA水平的影響.結果 SET7/9真覈錶達質粒pCMV-3tag-6-SET7/9可在C2C12細胞中有效錶達; SET7/9可使myogenin mRNA水平升高併能夠促進myogenin啟動子活性升高;榦擾SET7/9錶達可使myogenin mRNA水平降低.結論 組蛋白賴氨痠甲基轉移酶SET7/9可激活肌肉分化關鍵基因myogenin的轉錄.
목적 이용본조구건적소서조단백뢰안산갑기전이매SET7/9진핵표체질립급RNA간우(siRNA)질립,재체외성기세포분화모형C2C12세포중검측SET7/9대기육분화관건기인myogenin기인표체적영향.방법 전염SET7/9진핵표체질립pCMV-3tag-6-SET7/9 지C2C12세포,Western blot기술험증기표체;이용실시형광정량PCR(Real-time PCR)기술검측SET7/9대myogenin기인mRNA수평적영향;이용쌍형광소매보고계통검측SET7/9대myogenin기인계동자활성적영향;전염SET7/9적siRNA질립,이용Real-time PCR기술검측기억제효과이급대myogenin mRNA수평적영향.결과 SET7/9진핵표체질립pCMV-3tag-6-SET7/9가재C2C12세포중유효표체; SET7/9가사myogenin mRNA수평승고병능구촉진myogenin계동자활성승고;간우SET7/9표체가사myogenin mRNA수평강저.결론 조단백뢰안산갑기전이매SET7/9가격활기육분화관건기인myogenin적전록.
