热带亚热带植物学报
熱帶亞熱帶植物學報
열대아열대식물학보
JOURNAL OF TROPICAL AND SUBTROPICAL BOTANY
2011年
6期
513-518
,共6页
高志民%于小清%郑波%李雪平%胡陶
高誌民%于小清%鄭波%李雪平%鬍陶
고지민%우소청%정파%리설평%호도
毛竹%PsbS基因%克隆%载体构建%原核表达%温度
毛竹%PsbS基因%剋隆%載體構建%原覈錶達%溫度
모죽%PsbS기인%극륭%재체구건%원핵표체%온도
采用RT-PCR技术从毛竹(Phyllostachys edulis)叶片中克隆到1个PsbS基因,命名为PePsbS (GenBank No.FJ600727),其编码区为810 bp,编码269个氨基酸.序列分析表明,PePsbS编码的蛋白与其它单子叶植物的PsbS蛋白有很高的相似性.蛋白结构分析表明,PePsbS基因编码蛋白包含导肽部分和成熟蛋白,其中成熟蛋白包含4个跨膜结构域.将PePsbS基因编码成熟蛋白的序列构建到原核表达载体pET23a中,并转人大肠杆菌,用IPTG进行诱导表达.结果表明,41℃下诱导4h的表达效果最好,目的蛋白含量约占总蛋白的215%,分子量约为220 kD.这说明温度和诱导时间明显影响PePsbS基因的表达.
採用RT-PCR技術從毛竹(Phyllostachys edulis)葉片中剋隆到1箇PsbS基因,命名為PePsbS (GenBank No.FJ600727),其編碼區為810 bp,編碼269箇氨基痠.序列分析錶明,PePsbS編碼的蛋白與其它單子葉植物的PsbS蛋白有很高的相似性.蛋白結構分析錶明,PePsbS基因編碼蛋白包含導肽部分和成熟蛋白,其中成熟蛋白包含4箇跨膜結構域.將PePsbS基因編碼成熟蛋白的序列構建到原覈錶達載體pET23a中,併轉人大腸桿菌,用IPTG進行誘導錶達.結果錶明,41℃下誘導4h的錶達效果最好,目的蛋白含量約佔總蛋白的215%,分子量約為220 kD.這說明溫度和誘導時間明顯影響PePsbS基因的錶達.
채용RT-PCR기술종모죽(Phyllostachys edulis)협편중극륭도1개PsbS기인,명명위PePsbS (GenBank No.FJ600727),기편마구위810 bp,편마269개안기산.서렬분석표명,PePsbS편마적단백여기타단자협식물적PsbS단백유흔고적상사성.단백결구분석표명,PePsbS기인편마단백포함도태부분화성숙단백,기중성숙단백포함4개과막결구역.장PePsbS기인편마성숙단백적서렬구건도원핵표체재체pET23a중,병전인대장간균,용IPTG진행유도표체.결과표명,41℃하유도4h적표체효과최호,목적단백함량약점총단백적215%,분자량약위220 kD.저설명온도화유도시간명현영향PePsbS기인적표체.