华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
2期
171-177
,共7页
陶章生%徐雯%张苗苗%彭良才%丰胜求
陶章生%徐雯%張苗苗%彭良纔%豐勝求
도장생%서문%장묘묘%팽량재%봉성구
纤维素合酶%多克隆抗体%交叉反应%拟南芥%Western-blotting
纖維素閤酶%多剋隆抗體%交扠反應%擬南芥%Western-blotting
섬유소합매%다극륭항체%교차반응%의남개%Western-blotting
将拟南芥CesA家族基因的高变区克隆到融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-AtCesAs,在大肠杆菌JM109中经IPTG诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白(GST-AtCESAs).采用GST亲和层析法纯化GST-AtCESAs并制备了多克隆抗体.Western-blotting检测表明,抗体Anti-CESA4和Anti-CESA7存在明显的交叉反应,Anti-CESA1、Anti-CESA3、Anti-CESA6、Anti-CESA2、Anti-CESA5、Anti-CESA8均能在拟南芥原生质膜上检测到特异免疫条带,这为进一步深入研究拟南芥纤维素合成机制提供了有利条件.
將擬南芥CesA傢族基因的高變區剋隆到融閤錶達載體pGEX-4T-3中,構建重組質粒pGEX-AtCesAs,在大腸桿菌JM109中經IPTG誘導錶達穀胱甘肽巰基轉移酶融閤蛋白(GST-AtCESAs).採用GST親和層析法純化GST-AtCESAs併製備瞭多剋隆抗體.Western-blotting檢測錶明,抗體Anti-CESA4和Anti-CESA7存在明顯的交扠反應,Anti-CESA1、Anti-CESA3、Anti-CESA6、Anti-CESA2、Anti-CESA5、Anti-CESA8均能在擬南芥原生質膜上檢測到特異免疫條帶,這為進一步深入研究擬南芥纖維素閤成機製提供瞭有利條件.
장의남개CesA가족기인적고변구극륭도융합표체재체pGEX-4T-3중,구건중조질립pGEX-AtCesAs,재대장간균JM109중경IPTG유도표체곡광감태구기전이매융합단백(GST-AtCESAs).채용GST친화층석법순화GST-AtCESAs병제비료다극륭항체.Western-blotting검측표명,항체Anti-CESA4화Anti-CESA7존재명현적교차반응,Anti-CESA1、Anti-CESA3、Anti-CESA6、Anti-CESA2、Anti-CESA5、Anti-CESA8균능재의남개원생질막상검측도특이면역조대,저위진일보심입연구의남개섬유소합성궤제제공료유리조건.
