CAJ | 학술논문

目的探讨醛糖还原酶(AR)对大鼠肾脏系膜细胞(MsC) 表达细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)蛋白的影响,以及AR在肾小球硬化病变过程中的可能作用及其机制.方法采用酶切、连接方法构建真核表达质粒pCDNA3-AR,采用脂质体介导以及G418筛选的方法,将pCDNA3-AR稳定转染至MsC中,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法和免疫荧光检测转染MsC表达AR情况; 以Western 印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC、应用AR抑制剂Sorbinil和Zopolrestat的正常MsC、转化生长因子-β1(TGF-β1)作用后的正常MsC的FN和Col Ⅳ蛋白表达情况. 结果与正常MsC相比,TGF-β1作用后的正常MsC FN和Col Ⅳ蛋白表达水平分别增高1.6和1.7倍(P<0.01);AR转基因MsC的FN、Col Ⅳ表达分别增加1.8倍和1.5倍;应用Sorbinil时,FN和ColⅣ分别降低1.8倍和1.4倍(P<0.05);应用Zopolrestat时,FN和Col Ⅳ分别降低1.7倍和1.4倍(P<0.05).结论 AR高表达或活性受抑制时可以明显影响MsC FN、ColⅣ的蛋白表达,提示AR可能与肾小球硬化的病理过程有关.
목적탐토철당환원매(AR)대대서신장계막세포(MsC) 표체세포외기질성분섬련단백(FN)화Ⅳ형효원(Col Ⅳ)단백적영향,이급AR재신소구경화병변과정중적가능작용급기궤제.방법채용매절、련접방법구건진핵표체질립pCDNA3-AR,채용지질체개도이급G418사선적방법,장pCDNA3-AR은정전염지MsC중,응용역전록-취합매련반응(RT-PCR)、Western인적법화면역형광검측전염MsC표체AR정황; 이Western 인적법검측정상MsC、AR전기인MsC、응용AR억제제Sorbinil화Zopolrestat적정상MsC、전화생장인자-β1(TGF-β1)작용후적정상MsC적FN화Col Ⅳ단백표체정황. 결과여정상MsC상비,TGF-β1작용후적정상MsC FN화Col Ⅳ단백표체수평분별증고1.6화1.7배(P<0.01);AR전기인MsC적FN、Col Ⅳ표체분별증가1.8배화1.5배;응용Sorbinil시,FN화ColⅣ분별강저1.8배화1.4배(P<0.05);응용Zopolrestat시,FN화Col Ⅳ분별강저1.7배화1.4배(P<0.05).결론 AR고표체혹활성수억제시가이명현영향MsC FN、ColⅣ적단백표체,제시AR가능여신소구경화적병리과정유관.