CAJ | 학술논문

利用稳定过表达人类T型钙通道αqG亚单位的HEK-293细胞研究了T型钙通道在细胞增殖中的作用.RT-PCR和标准全细胞膜片钳记录分别从mRNA转录水平和T型钙通道蛋白功能水平验证了α1G亚单位的过表达的实现.生长曲线表明,T型钙通道α1G亚单位的过表达能显著促进细胞增殖,HEKα1G+细胞的细胞群体倍增时间(13.7±0.3h)比对照HEK-293细胞的细胞群体倍增时间(22.1±1.1h)缩短了约8h;流式细胞分析结果也与此吻合,在稳定过表达了人类T型钙通道α1G亚单位的细胞处于S期的细胞百分率比对照HEK-293细胞高,相反地处于G0/G1期的百分率比对照HEK-293细胞低,以上结果证明过表达T型钙通道αqG亚单位能促进细胞增殖;T型钙通道特异性阻断剂mibefradil抑制HEKα1G+细胞增殖,IC50为3.5μmol/L,表明在HEK-293细胞过表达T型钙通道对细胞增殖的促进作用可以被T型钙通道特异性阻断剂mibefradil抑制,这就进一步证明了T型钙通道在促进细胞增殖方面的直接作用.Western杂交结果提示了T型钙通道α1G亚单位的表达是通过某种信号途径提高了与细胞周期有关的蛋白质,cyclin A、cyclin E和CDK2的表达水平,从而刺激了细胞周期的进程.本研究有助于理解细胞增殖的机制并为开发治疗与细胞增殖异常有关疾病的新药提供了理论依据.
이용은정과표체인류T형개통도αqG아단위적HEK-293세포연구료T형개통도재세포증식중적작용.RT-PCR화표준전세포막편겸기록분별종mRNA전록수평화T형개통도단백공능수평험증료α1G아단위적과표체적실현.생장곡선표명,T형개통도α1G아단위적과표체능현저촉진세포증식,HEKα1G+세포적세포군체배증시간(13.7±0.3h)비대조HEK-293세포적세포군체배증시간(22.1±1.1h)축단료약8h;류식세포분석결과야여차문합,재은정과표체료인류T형개통도α1G아단위적세포처우S기적세포백분솔비대조HEK-293세포고,상반지처우G0/G1기적백분솔비대조HEK-293세포저,이상결과증명과표체T형개통도αqG아단위능촉진세포증식;T형개통도특이성조단제mibefradil억제HEKα1G+세포증식,IC50위3.5μmol/L,표명재HEK-293세포과표체T형개통도대세포증식적촉진작용가이피T형개통도특이성조단제mibefradil억제,저취진일보증명료T형개통도재촉진세포증식방면적직접작용.Western잡교결과제시료T형개통도α1G아단위적표체시통과모충신호도경제고료여세포주기유관적단백질,cyclin A、cyclin E화CDK2적표체수평,종이자격료세포주기적진정.본연구유조우리해세포증식적궤제병위개발치료여세포증식이상유관질병적신약제공료이론의거.