长江大学学报（自科版）
長江大學學報（自科版）
장강대학학보（자과판）
JOURNAL OF YANGTZE UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
11期
76-79
,共4页
刘乐承%余小林%叶纨芝%向珣%卢钢%曹家树
劉樂承%餘小林%葉紈芝%嚮珣%盧鋼%曹傢樹
류악승%여소림%협환지%향순%로강%조가수
反义基因%拟南芥(Arabidopsis thaliana)%BcMF3%白菜%表达载体%遗传转化
反義基因%擬南芥(Arabidopsis thaliana)%BcMF3%白菜%錶達載體%遺傳轉化
반의기인%의남개(Arabidopsis thaliana)%BcMF3%백채%표체재체%유전전화
根据编码白菜(Brassica rapa L. ssp. chinensis,syn B. campestris ssp. chinensis)果胶甲酯酶的BcMF3 基因cDNA 序列内部第1 343～1 797个碱基之间序列设计引物,从白菜花蕾cDNA中PCR扩增出455 bp的片段,把该片段作为反义基因连接至双元载体pBI12l上,得到了植物表达栽体pBI-B3,并用"三亲杂交"法导入农杆菌LBA4404菌株中,PCR扩增和酶切结果表明所构建的植物表达载体pBI-B3含有BcMF3 反义基因片断,并已导入了根癌农杆菌(Agrobacterinm tumefuciens)中;采用花序浸润法转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)后,播种筛选浸润植株的种子获得了5 株卡那霉素抗性植株,PCR 扩增证明BcMF3反义片段成功整合到拟南芥基因组中;转基因拟南芥子代(T2)的抗性分离符合孟德尔分离比例,表明外源基因是单一位点插入.
根據編碼白菜(Brassica rapa L. ssp. chinensis,syn B. campestris ssp. chinensis)果膠甲酯酶的BcMF3 基因cDNA 序列內部第1 343～1 797箇堿基之間序列設計引物,從白菜花蕾cDNA中PCR擴增齣455 bp的片段,把該片段作為反義基因連接至雙元載體pBI12l上,得到瞭植物錶達栽體pBI-B3,併用"三親雜交"法導入農桿菌LBA4404菌株中,PCR擴增和酶切結果錶明所構建的植物錶達載體pBI-B3含有BcMF3 反義基因片斷,併已導入瞭根癌農桿菌(Agrobacterinm tumefuciens)中;採用花序浸潤法轉化擬南芥(Arabidopsis thaliana)後,播種篩選浸潤植株的種子穫得瞭5 株卡那黴素抗性植株,PCR 擴增證明BcMF3反義片段成功整閤到擬南芥基因組中;轉基因擬南芥子代(T2)的抗性分離符閤孟德爾分離比例,錶明外源基因是單一位點插入.
근거편마백채(Brassica rapa L. ssp. chinensis,syn B. campestris ssp. chinensis)과효갑지매적BcMF3 기인cDNA 서렬내부제1 343～1 797개감기지간서렬설계인물,종백채화뢰cDNA중PCR확증출455 bp적편단,파해편단작위반의기인련접지쌍원재체pBI12l상,득도료식물표체재체pBI-B3,병용"삼친잡교"법도입농간균LBA4404균주중,PCR확증화매절결과표명소구건적식물표체재체pBI-B3함유BcMF3 반의기인편단,병이도입료근암농간균(Agrobacterinm tumefuciens)중;채용화서침윤법전화의남개(Arabidopsis thaliana)후,파충사선침윤식주적충자획득료5 주잡나매소항성식주,PCR 확증증명BcMF3반의편단성공정합도의남개기인조중;전기인의남개자대(T2)적항성분리부합맹덕이분리비례,표명외원기인시단일위점삽입.
