CAJ | 학술논문

本研究利用TSA(Trichostatin A)、ROS(Roscovitine)、血清饥饿和接触抑制方法处理牛卵丘/颗粒细胞,检测处理前后细胞乙酰化水平、周期分布及其对重组胚发育能力的影响,为提高核移植效率提供理论基础.分别采用上述方法处理牛卵丘/颗粒细胞,首先对处理的细胞形态及活率进行观察,并利用流式分选技术检测处理细胞的周期分布,再通过间接免疫荧光法检测经上述不同处理前后细胞乙酰化水平变化,最后以上述处理细胞作为核供体构建重组胚,比较重组胚发育水平的不同.试验结果显示,经上述处理的卵丘/颗粒细胞形态良好,活率均保持在94%以上;TSA处理卵丘/颗粒细胞后,其乙酰化水平较对照组和其他处理组明显增加(P＜0.05).经ROS处理的卵丘/颗粒细胞乙酰化表达水平同样高于对照组(P＜0.05),但仍低于TSA处理组(P＜0.05),但经血清饥饿处理的卵丘/颗粒细胞乙酰化水平较对照组明显降低(P＜0.05);利用TSA处理卵丘/颗粒细胞24 h后,细胞被明显抑制在G0/G1期,且较其他处理组的抑制现象更加明显(P＜0.05);并且,经TSA处理后的卵丘/颗粒细胞充当供体细胞,其卵裂率和囊胚率较对照组明显增加(P＜O.01,(85.2±3.4)%us(68.6±6.7)%;(30.2±5.7)%us(10.4±8.3)%).经TSA处理的牛卵丘/颗粒细胞,与其他处理组相比,乙酰化水平较高,细胞形态良好,细胞周期被明显抑制在G0/G1期,且获得了较高的卵裂率和囊胚率,作为供体细胞的处理方式较为适合.
본연구이용TSA(Trichostatin A)、ROS(Roscovitine)、혈청기아화접촉억제방법처리우란구/과립세포,검측처리전후세포을선화수평、주기분포급기대중조배발육능력적영향,위제고핵이식효솔제공이론기출.분별채용상술방법처리우란구/과립세포,수선대처리적세포형태급활솔진행관찰,병이용류식분선기술검측처리세포적주기분포,재통과간접면역형광법검측경상술불동처리전후세포을선화수평변화,최후이상술처리세포작위핵공체구건중조배,비교중조배발육수평적불동.시험결과현시,경상술처리적란구/과립세포형태량호,활솔균보지재94%이상;TSA처리란구/과립세포후,기을선화수평교대조조화기타처리조명현증가(P＜0.05).경ROS처리적란구/과립세포을선화표체수평동양고우대조조(P＜0.05),단잉저우TSA처리조(P＜0.05),단경혈청기아처리적란구/과립세포을선화수평교대조조명현강저(P＜0.05);이용TSA처리란구/과립세포24 h후,세포피명현억제재G0/G1기,차교기타처리조적억제현상경가명현(P＜0.05);병차,경TSA처리후적란구/과립세포충당공체세포,기란렬솔화낭배솔교대조조명현증가(P＜O.01,(85.2±3.4)%us(68.6±6.7)%;(30.2±5.7)%us(10.4±8.3)%).경TSA처리적우란구/과립세포,여기타처리조상비,을선화수평교고,세포형태량호,세포주기피명현억제재G0/G1기,차획득료교고적란렬솔화낭배솔,작위공체세포적처리방식교위괄합.