牛分枝杆菌mpb51-63融合基因的克隆及其原核表达
우분지간균mpb51-63융합기인적극륭급기원핵표체
Cloning and prokaryotic expression of Mycobacterium bovis mpb51-63 fusion gene
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2010年 11期 898-900 ,共3页

    李璐璐%王春芳%任飞%刘新宇%宁浩然%刘磊%李冰洁%姜秀云%何昭阳

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    우분지간균%mpb51-63융합기인%극륭%원핵표체
    为提高牛分枝杆菌(M.bovis)单一抗原的抗原性,本研究以重叠延伸拼接PCR技术将M.bovismpb51与mpb63基因连接,并克隆至pMD18-T中,构建重组质粒pMD-51-63.以BamH I和EcoR I双酶切pMD-51-63和pET28a(+),将纯化的mpb51-63融合基因亚克隆至pET28a(+)中,获得了重组表达质粒pET-51-63.该重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,表达约46 ku的外源融合蛋白,免疫印迹实验证实,该融合蛋白具有M bovis的抗原反应性.为进一步研究mpb51-63融合基因及其表达产物作为牛结核病亚单位疫苗、核酸疫苗以及特异的诊断试剂奠定了基础.
    위제고우분지간균(M.bovis)단일항원적항원성,본연구이중첩연신병접PCR기술장M.bovismpb51여mpb63기인련접,병극륭지pMD18-T중,구건중조질립pMD-51-63.이BamH I화EcoR I쌍매절pMD-51-63화pET28a(+),장순화적mpb51-63융합기인아극륭지pET28a(+)중,획득료중조표체질립pET-51-63.해중조질립재대장간균BL21(DE3)중경IPTG유도화SDS-PAGE분석,표체약46 ku적외원융합단백,면역인적실험증실,해융합단백구유M bovis적항원반응성.위진일보연구mpb51-63융합기인급기표체산물작위우결핵병아단위역묘、핵산역묘이급특이적진단시제전정료기출.
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