动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2011年
10期
63-66
,共4页
李秋霞%刘永录%龚剑%马仲彬%陈乃壮%杨明锋%张国祖
李鞦霞%劉永錄%龔劍%馬仲彬%陳迺壯%楊明鋒%張國祖
리추하%류영록%공검%마중빈%진내장%양명봉%장국조
鸡α干扰素%原核表达%抗病毒活性
鷄α榦擾素%原覈錶達%抗病毒活性
계α간우소%원핵표체%항병독활성
采用PCR方法从三黄鸡血液基因组中扩增鸡α干扰素全基因,并克隆和测序.序列分析表明,基因全长为582 bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489 bp.将该片段与表达载体pET-28a连接克隆至大肠埃希菌DH5α菌株,经测序和酶切鉴定,选取正向插入、读码框正确的阳性克隆.构建重组质粒并转化BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白以包涵体形式在BL21 (DE3)高效表达,经His亲和层析柱得以纯化.鸡胚试验表明,重组干扰素抵抗新城疫病毒效果显著,能保护鸡胚并能够延迟和减少新城疫病毒的复制.
採用PCR方法從三黃鷄血液基因組中擴增鷄α榦擾素全基因,併剋隆和測序.序列分析錶明,基因全長為582 bp,亞剋隆其成熟蛋白編碼基因489 bp.將該片段與錶達載體pET-28a連接剋隆至大腸埃希菌DH5α菌株,經測序和酶切鑒定,選取正嚮插入、讀碼框正確的暘性剋隆.構建重組質粒併轉化BL21(DE3),經IPTG誘導,融閤蛋白以包涵體形式在BL21 (DE3)高效錶達,經His親和層析柱得以純化.鷄胚試驗錶明,重組榦擾素牴抗新城疫病毒效果顯著,能保護鷄胚併能夠延遲和減少新城疫病毒的複製.
채용PCR방법종삼황계혈액기인조중확증계α간우소전기인,병극륭화측서.서렬분석표명,기인전장위582 bp,아극륭기성숙단백편마기인489 bp.장해편단여표체재체pET-28a련접극륭지대장애희균DH5α균주,경측서화매절감정,선취정향삽입、독마광정학적양성극륭.구건중조질립병전화BL21(DE3),경IPTG유도,융합단백이포함체형식재BL21 (DE3)고효표체,경His친화층석주득이순화.계배시험표명,중조간우소저항신성역병독효과현저,능보호계배병능구연지화감소신성역병독적복제.
