化学学报
化學學報
화학학보
ACTA CHIMICA SINICA
2002年
4期
737-743
,共7页
杨斌盛%白海静%刘文%丰九英
楊斌盛%白海靜%劉文%豐九英
양빈성%백해정%류문%봉구영
转铁蛋白,铽(Ⅲ)离子,变温,荧光光谱
轉鐵蛋白,鋱(Ⅲ)離子,變溫,熒光光譜
전철단백,특(Ⅲ)리자,변온,형광광보
在pH 7.4,0.01 mol/L N-2-羟乙基哌嗪-N′-2-乙磺酸(Hepes)条件下,铽(Ⅲ)与N,N′-二(2-羟苄基)乙二胺-N,N′-二乙酸(HBED)结合并发生交换相互作用使铽(Ⅲ)荧光增强104倍,通过监测铽(Ⅲ)545 nm荧光强度的变化测定了Tb-HBED配合物的条件稳定常数是lgK=14.30±0.49;Tb-HBED配合物中配体、铽(Ⅲ)荧光强度均随着温度的升高而降低.在pH 7.4,0.01 mol/L Hepes条件下,TbN-apoTf-Tbc配合物中蛋白质的荧光强度随着温度的升高而降低,而能量受体铽(Ⅲ)的荧光强度随着温度的升高而增强,主要源于铽(Ⅲ)与螺旋5色氨酸残基间的无辐射能量转移;当温度由0℃上升到55℃时,平均能量转移效率AE值增加了29%,给体、受体间距离R有约4.2%的减小,温度变化引起TbN-apoTf-Tbc配合物大的构象变化;铽(Ⅲ)与人血清脱铁转铁蛋白的结合使蛋白质的变性温度降低.同样条件下,TbN-apoOTf-Tbc配合物与TbN-apoTf-Tbc配合物有所不同,虽然能量给体的荧光强度随着温度的增加而减小,但铽(Ⅲ)荧光强度没有明显的增强;铽(Ⅲ)对蛋白质的变性温度几乎没有影响.
在pH 7.4,0.01 mol/L N-2-羥乙基哌嗪-N′-2-乙磺痠(Hepes)條件下,鋱(Ⅲ)與N,N′-二(2-羥芐基)乙二胺-N,N′-二乙痠(HBED)結閤併髮生交換相互作用使鋱(Ⅲ)熒光增彊104倍,通過鑑測鋱(Ⅲ)545 nm熒光彊度的變化測定瞭Tb-HBED配閤物的條件穩定常數是lgK=14.30±0.49;Tb-HBED配閤物中配體、鋱(Ⅲ)熒光彊度均隨著溫度的升高而降低.在pH 7.4,0.01 mol/L Hepes條件下,TbN-apoTf-Tbc配閤物中蛋白質的熒光彊度隨著溫度的升高而降低,而能量受體鋱(Ⅲ)的熒光彊度隨著溫度的升高而增彊,主要源于鋱(Ⅲ)與螺鏇5色氨痠殘基間的無輻射能量轉移;噹溫度由0℃上升到55℃時,平均能量轉移效率AE值增加瞭29%,給體、受體間距離R有約4.2%的減小,溫度變化引起TbN-apoTf-Tbc配閤物大的構象變化;鋱(Ⅲ)與人血清脫鐵轉鐵蛋白的結閤使蛋白質的變性溫度降低.同樣條件下,TbN-apoOTf-Tbc配閤物與TbN-apoTf-Tbc配閤物有所不同,雖然能量給體的熒光彊度隨著溫度的增加而減小,但鋱(Ⅲ)熒光彊度沒有明顯的增彊;鋱(Ⅲ)對蛋白質的變性溫度幾乎沒有影響.
재pH 7.4,0.01 mol/L N-2-간을기고진-N′-2-을광산(Hepes)조건하,특(Ⅲ)여N,N′-이(2-간변기)을이알-N,N′-이을산(HBED)결합병발생교환상호작용사특(Ⅲ)형광증강104배,통과감측특(Ⅲ)545 nm형광강도적변화측정료Tb-HBED배합물적조건은정상수시lgK=14.30±0.49;Tb-HBED배합물중배체、특(Ⅲ)형광강도균수착온도적승고이강저.재pH 7.4,0.01 mol/L Hepes조건하,TbN-apoTf-Tbc배합물중단백질적형광강도수착온도적승고이강저,이능량수체특(Ⅲ)적형광강도수착온도적승고이증강,주요원우특(Ⅲ)여라선5색안산잔기간적무복사능량전이;당온도유0℃상승도55℃시,평균능량전이효솔AE치증가료29%,급체、수체간거리R유약4.2%적감소,온도변화인기TbN-apoTf-Tbc배합물대적구상변화;특(Ⅲ)여인혈청탈철전철단백적결합사단백질적변성온도강저.동양조건하,TbN-apoOTf-Tbc배합물여TbN-apoTf-Tbc배합물유소불동,수연능량급체적형광강도수착온도적증가이감소,단특(Ⅲ)형광강도몰유명현적증강;특(Ⅲ)대단백질적변성온도궤호몰유영향.