实验生物学报
實驗生物學報
실험생물학보
ACTA BIOLOGIAE EXPERIMENTLIS SINICA
2000年
4期
301-307
,共7页
余旭红%郑志仁%刘平林%何玉科
餘旭紅%鄭誌仁%劉平林%何玉科
여욱홍%정지인%류평림%하옥과
大白菜%BcpLH基因%RNA结合蛋白%融合表达%Western斑点印迹分析
大白菜%BcpLH基因%RNA結閤蛋白%融閤錶達%Western斑點印跡分析
대백채%BcpLH기인%RNA결합단백%융합표체%Western반점인적분석
BcpLH基因是大白菜包叶组织特异的新基因,含有双链RNA结合域.在含有His标记序列的原核表达载体pET28-a(+)上插入Bc-pLH基因的cDNA,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达出了特异性蛋白,并免疫大白兔制备出高效价的抗血清;同时,将BcpLH基因插入到含有超级助溶剂的pMAL-c2载体上,并在大肠杆菌DH5α中诱导表达,结果获得了可溶的蛋白.Western斑点印迹分析的结果证明了BcpLH的特异性.BcpLH活性蛋白及其抗血清的产生为研究BcpLH基因的RNA结合活性及其在植物发育上的调节机制创造了条件.
BcpLH基因是大白菜包葉組織特異的新基因,含有雙鏈RNA結閤域.在含有His標記序列的原覈錶達載體pET28-a(+)上插入Bc-pLH基因的cDNA,在大腸桿菌BL21(DE3)中誘導錶達齣瞭特異性蛋白,併免疫大白兔製備齣高效價的抗血清;同時,將BcpLH基因插入到含有超級助溶劑的pMAL-c2載體上,併在大腸桿菌DH5α中誘導錶達,結果穫得瞭可溶的蛋白.Western斑點印跡分析的結果證明瞭BcpLH的特異性.BcpLH活性蛋白及其抗血清的產生為研究BcpLH基因的RNA結閤活性及其在植物髮育上的調節機製創造瞭條件.
BcpLH기인시대백채포협조직특이적신기인,함유쌍련RNA결합역.재함유His표기서렬적원핵표체재체pET28-a(+)상삽입Bc-pLH기인적cDNA,재대장간균BL21(DE3)중유도표체출료특이성단백,병면역대백토제비출고효개적항혈청;동시,장BcpLH기인삽입도함유초급조용제적pMAL-c2재체상,병재대장간균DH5α중유도표체,결과획득료가용적단백.Western반점인적분석적결과증명료BcpLH적특이성.BcpLH활성단백급기항혈청적산생위연구BcpLH기인적RNA결합활성급기재식물발육상적조절궤제창조료조건.
