CAJ | 학술논문

从临床表现为仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染,采用无污染的猪肾细胞系(PK15)分离培养,并连续传代培育成一株细胞培养适应毒,命名为PCV2/LG株.分离毒株经细胞培养,于第25代后毒价显著升高,于第35代毒价可达105.6CID/50/mL.采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)、免疫电镜技术、分子克隆及核酸序列分析等鉴定表明,分离株感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质中;病毒感染的阳性细胞呈散在分布,阳性细胞数可达50%以上;免疫电镜观察到与PCV2特异抗体结合形成的病毒免疫复合物呈实心小颗粒样粒子团,病毒粒子直径约为17 nm;病毒抗原基因组由1768个核苷酸组成,与GenBank登录的8个PCV2基因组序列同源性达96.2%以上.用2 mL的病毒细胞培养物(105.6CID50/mL)接种30日龄PCV2抗体阴性仔猪3头,可引起典型PMWS临床症状.本研究为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、诊断及分子生物学等研究奠定了基础.
종림상표현위자저단내후다계통쇠갈종합정(PMWS)림파조직병료,경취합매련식반응(PCR)증실위저원배병독2형(PCV2)감염,채용무오염적저신세포계(PK15)분리배양,병련속전대배육성일주세포배양괄응독,명명위PCV2/LG주.분리독주경세포배양,우제25대후독개현저승고,우제35대독개가체105.6CID/50/mL.채용면역과양화물매단층세포염색법(IPMA)、면역전경기술、분자극륭급핵산서렬분석등감정표명,분리주감염세포후병독항원주요분포재세포핵급세포질중;병독감염적양성세포정산재분포,양성세포수가체50%이상;면역전경관찰도여PCV2특이항체결합형성적병독면역복합물정실심소과립양입자단,병독입자직경약위17 nm;병독항원기인조유1768개핵감산조성,여GenBank등록적8개PCV2기인조서렬동원성체96.2%이상.용2 mL적병독세포배양물(105.6CID50/mL)접충30일령PCV2항체음성자저3두,가인기전형PMWS림상증상.본연구위진일보개전해병독적치병성、역묘면역、진단급분자생물학등연구전정료기출.