实用临床医学
實用臨床醫學
실용림상의학
Practical Clinical Medicine
2006年
6期
6-9,16
,共5页
许丽%杨应周%谭卫国%吴清芳%张玉华%罗育希
許麗%楊應週%譚衛國%吳清芳%張玉華%囉育希
허려%양응주%담위국%오청방%장옥화%라육희
寡核苷酸,反义%气道上皮细胞%细胞增殖%FAK磷酸化
寡覈苷痠,反義%氣道上皮細胞%細胞增殖%FAK燐痠化
과핵감산,반의%기도상피세포%세포증식%FAK린산화
目的:研究粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)磷酸化对细胞外基质成份诱导的气道上皮细胞增殖和细胞周期演进的影响,探讨粘着斑激酶活化对气道上皮细胞损伤后修复影响的机制.方法:通过纤维连接蛋白(finbronectin,FN)诱导培养的气道上皮细胞,利用四唑盐(MTT)比色实验研究气道上皮细胞增殖情况,采用流式细胞术分析气道上皮细胞细胞周期各期分布,以Western blot和免疫共沉淀检测FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度;以FAK反义寡核苷酸(ODNs)经脂质体转染细胞,观察其对FAK磷酸化、细胞增殖和细胞在细胞周期各期分布的影响.结果:FN诱导的气道上皮细胞MTT吸光度明显增强,G1期细胞数量明显减少,S期和G2期细胞数量明显增多,同时FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度显著增高;经脂质体转染了反义FAK寡核苷酸的气道上皮细胞MTT吸光度值显著降低,G1期细胞数明显增多,S期和G2期细胞数显著减少,FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度降低,且与G1期细胞数量的增多成显著负相关,与S期、G2期细胞数量和MTT吸光度的减少成明显正相关.结论:FAK是细胞外基质诱导气道上皮细胞增殖的重要信号分子,其活化促进气道上皮细胞的增殖和细胞周期的演进,在气道上皮细胞损伤后修复过程中起重要作用.
目的:研究粘著斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)燐痠化對細胞外基質成份誘導的氣道上皮細胞增殖和細胞週期縯進的影響,探討粘著斑激酶活化對氣道上皮細胞損傷後脩複影響的機製.方法:通過纖維連接蛋白(finbronectin,FN)誘導培養的氣道上皮細胞,利用四唑鹽(MTT)比色實驗研究氣道上皮細胞增殖情況,採用流式細胞術分析氣道上皮細胞細胞週期各期分佈,以Western blot和免疫共沉澱檢測FAK錶達水平及其酪氨痠燐痠化程度;以FAK反義寡覈苷痠(ODNs)經脂質體轉染細胞,觀察其對FAK燐痠化、細胞增殖和細胞在細胞週期各期分佈的影響.結果:FN誘導的氣道上皮細胞MTT吸光度明顯增彊,G1期細胞數量明顯減少,S期和G2期細胞數量明顯增多,同時FAK錶達水平及其酪氨痠燐痠化程度顯著增高;經脂質體轉染瞭反義FAK寡覈苷痠的氣道上皮細胞MTT吸光度值顯著降低,G1期細胞數明顯增多,S期和G2期細胞數顯著減少,FAK錶達水平及其酪氨痠燐痠化程度降低,且與G1期細胞數量的增多成顯著負相關,與S期、G2期細胞數量和MTT吸光度的減少成明顯正相關.結論:FAK是細胞外基質誘導氣道上皮細胞增殖的重要信號分子,其活化促進氣道上皮細胞的增殖和細胞週期的縯進,在氣道上皮細胞損傷後脩複過程中起重要作用.
목적:연구점착반격매(focal adhesion kinase,FAK)린산화대세포외기질성빈유도적기도상피세포증식화세포주기연진적영향,탐토점착반격매활화대기도상피세포손상후수복영향적궤제.방법:통과섬유련접단백(finbronectin,FN)유도배양적기도상피세포,이용사서염(MTT)비색실험연구기도상피세포증식정황,채용류식세포술분석기도상피세포세포주기각기분포,이Western blot화면역공침정검측FAK표체수평급기락안산린산화정도;이FAK반의과핵감산(ODNs)경지질체전염세포,관찰기대FAK린산화、세포증식화세포재세포주기각기분포적영향.결과:FN유도적기도상피세포MTT흡광도명현증강,G1기세포수량명현감소,S기화G2기세포수량명현증다,동시FAK표체수평급기락안산린산화정도현저증고;경지질체전염료반의FAK과핵감산적기도상피세포MTT흡광도치현저강저,G1기세포수명현증다,S기화G2기세포수현저감소,FAK표체수평급기락안산린산화정도강저,차여G1기세포수량적증다성현저부상관,여S기、G2기세포수량화MTT흡광도적감소성명현정상관.결론:FAK시세포외기질유도기도상피세포증식적중요신호분자,기활화촉진기도상피세포적증식화세포주기적연진,재기도상피세포손상후수복과정중기중요작용.
