CAJ | 학술논문

目的:研制抗PRRSV M蛋白的单克隆抗体(McAb),以期获得中和性单克隆抗体.方法:将PRRSV M蛋白的基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,利用构建成的重组真核质粒免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSV M蛋白的单抗,建立间接ELISA方法筛选阳性克隆.利用试剂盒检测Ig亚类.通过免疫印迹(Westem blot)、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定McAb的特异性.间接ELISA和病毒中和试验检测杂交瘤细胞上清McAb效价和腹水McAb效价.结果:获得3株可分泌特异性抗PRRSV M蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A7、4G3、5F3.1A7和4G3的Ig亚类为IgM.ELISA检测杂交瘤细胞培养上清效价为1:64～1:1 024,腹水效价为1:3 200～1:10240.同时用Western blot、IFA检测,结果均是阳性.4G3和1A7相对亲和力不同,证明其识别不同抗原位点.1A7和4G3具有病毒中和活性,中和效价达到1:96.结论:获得2株特异性抗PRRSV M蛋白的中和性单抗,为PRRSV诊断和免疫预防研究奠定了重要基础.
목적:연제항PRRSV M단백적단극륭항체(McAb),이기획득중화성단극륭항체.방법:장PRRSV M단백적기인극륭입진핵표체재체pcDNA3.1,이용구건성적중조진핵질립면역BALB/c소서,채용잡교류기술제비항PRRSV M단백적단항,건립간접ELISA방법사선양성극륭.이용시제합검측Ig아류.통과면역인적(Westem blot)、간접면역형광시험(IFA)감정McAb적특이성.간접ELISA화병독중화시험검측잡교류세포상청McAb효개화복수McAb효개.결과:획득3주가분비특이성항PRRSV M단백항체적잡교류세포주,분별명명위1A7、4G3、5F3.1A7화4G3적Ig아류위IgM.ELISA검측잡교류세포배양상청효개위1:64～1:1 024,복수효개위1:3 200～1:10240.동시용Western blot、IFA검측,결과균시양성.4G3화1A7상대친화력불동,증명기식별불동항원위점.1A7화4G3구유병독중화활성,중화효개체도1:96.결론:획득2주특이성항PRRSV M단백적중화성단항,위PRRSV진단화면역예방연구전정료중요기출.