中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2007年
4期
296-299
,共4页
李利%金立杰%赵小琳%杨屹%刘岩松%董厉子%郝富勇%李建平
李利%金立傑%趙小琳%楊屹%劉巖鬆%董厲子%郝富勇%李建平
리리%금립걸%조소림%양흘%류암송%동려자%학부용%리건평
乙型肝炎病毒%preS2蛋白%S蛋白%纯化%免疫效果
乙型肝炎病毒%preS2蛋白%S蛋白%純化%免疫效果
을형간염병독%preS2단백%S단백%순화%면역효과
目的 研究重组毕赤酵母表达的乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化方法及免疫效果.方法 甲醇诱导含preS2S基因的重组毕赤酵母菌,采用蔗糖区带速率离心、Butyl-S-Sepharose 4FF疏水层析和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析等方法,对表达产物进行纯化.纯化后蛋白经SDS-PAGE和Western blot方法鉴定,制备成疫苗,并进行效力试验.放射免疫法检测免疫小鼠血清抗体浓度,计算ED50和相对效力.ELISA法检测血清中的preS2S抗体.结果 纯化后的preS2(epi)S蛋白相对分子质量约为27 000,且能与特异性抗体结合.两批纯化蛋白制备的疫苗ED50分别为0.35和0.48 μg/ml,参比苗为0.52 μg/ml.2批疫苗的体外相对效力分别为1.5和1.1,均合格,血清抗体平均浓度为808和784 mIU/ml,参比苗为312 mIU/ml.2批疫苗免疫小鼠后均产生了preS2抗体.结论 该纯化方法实用有效,纯化后的preS2(epi)S蛋白比S蛋白具有更好的免疫原性.
目的 研究重組畢赤酵母錶達的乙型肝炎病毒preS2S蛋白的純化方法及免疫效果.方法 甲醇誘導含preS2S基因的重組畢赤酵母菌,採用蔗糖區帶速率離心、Butyl-S-Sepharose 4FF疏水層析和DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換層析等方法,對錶達產物進行純化.純化後蛋白經SDS-PAGE和Western blot方法鑒定,製備成疫苗,併進行效力試驗.放射免疫法檢測免疫小鼠血清抗體濃度,計算ED50和相對效力.ELISA法檢測血清中的preS2S抗體.結果 純化後的preS2(epi)S蛋白相對分子質量約為27 000,且能與特異性抗體結閤.兩批純化蛋白製備的疫苗ED50分彆為0.35和0.48 μg/ml,參比苗為0.52 μg/ml.2批疫苗的體外相對效力分彆為1.5和1.1,均閤格,血清抗體平均濃度為808和784 mIU/ml,參比苗為312 mIU/ml.2批疫苗免疫小鼠後均產生瞭preS2抗體.結論 該純化方法實用有效,純化後的preS2(epi)S蛋白比S蛋白具有更好的免疫原性.
목적 연구중조필적효모표체적을형간염병독preS2S단백적순화방법급면역효과.방법 갑순유도함preS2S기인적중조필적효모균,채용자당구대속솔리심、Butyl-S-Sepharose 4FF소수층석화DEAE-Sepharose Fast Flow리자교환층석등방법,대표체산물진행순화.순화후단백경SDS-PAGE화Western blot방법감정,제비성역묘,병진행효력시험.방사면역법검측면역소서혈청항체농도,계산ED50화상대효력.ELISA법검측혈청중적preS2S항체.결과 순화후적preS2(epi)S단백상대분자질량약위27 000,차능여특이성항체결합.량비순화단백제비적역묘ED50분별위0.35화0.48 μg/ml,삼비묘위0.52 μg/ml.2비역묘적체외상대효력분별위1.5화1.1,균합격,혈청항체평균농도위808화784 mIU/ml,삼비묘위312 mIU/ml.2비역묘면역소서후균산생료preS2항체.결론 해순화방법실용유효,순화후적preS2(epi)S단백비S단백구유경호적면역원성.
